实验四-花粉母细胞涂抹制片技术.doc

实验四 花粉母细胞涂抹制片技术 一、 实验目的： 掌握植物花粉母细胞减数分裂过程观察的取材、固定、染色和制片方法；熟练掌握植物花粉母细胞涂抹片制作；进一步熟悉减数分裂的基本知识。 二、 实验原理： 减数分裂是生物在性母性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的有丝分裂。包括连续的两次细胞分裂阶段：第一次分裂为染色体数目减半，第二次分裂为染色体数目等数分裂。最终形成四个子细胞，并发育成雌性或雄性配子，雌雄配子受精结合成为合子，发育成为新的个体。这样新个体又恢复到原有的染色体数目，保证遗传物质的稳定性，对于物种的延续有重要意义，同时同源染色体配对后，非姊妹染色单体片段的交换、不同基因型的雌雄配子结合等基因重组，为生物变异提供了重要的物质基础，为生物的多样性即适应及进化和人工选择提供了丰富的材料，奠定了基础。 减数分裂第一次分裂，可分为前间期，前期Ⅰ、中期Ⅰ、后期Ⅰ和末期Ⅰ。 第一次分裂，可分为中间期，前期Ⅱ、中期Ⅱ、后期Ⅱ和末期Ⅱ 前期Ⅰ又分为5个时期：细线期（两条染色单体）， 偶线期（配对-二价体） 粗线期（交换-重组） 双线期（交叉） 终变期（交叉端化）。 高等植物减数分裂主要发生在花药和胚囊中的孢原细胞，由于花药取材容易，操作和鉴定方便，因此用植物花药为为减数分裂的观察材料。 三、 实验材料 洋葱花序、大葱花序等。 四、 实验用具及药品 培养皿、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、解剖针、木夹、吸水纸、滤纸、铅笔、显微镜、电脑等。 无水酒精及梯度酒精、1mol/L盐酸、1%乙酸洋红、卡诺氏固定液、苏木精、铁矾、水合氯醛 五、 步骤 （1） 取材制片： 取花序1个，放在载玻片上，用解剖针取上中下不同部位小花各1个，分别取花药2枚，用镊子固定花药一端，用刀片将另一端切去部分，再用解剖针从镊子一端向另一端涂抹成一薄层，涂抹后马上加染料；或者取花药后，加染料，用镊子将花药捣碎，将可见残渣去掉2-5分钟后，盖片，轻压或轻敲。 （2） 观察： 制好的玻片，先用低倍镜下观察，再用高倍镜（40倍），找到减数分裂的各分裂相。 六、 实验作业 提交作业2个图片，完成绘图 5个时期分裂相。