生物化学实验报告_2.doc

生物化学实验报告 蛋白质的定量测定 第四组 2015.10.15 姓名：XXX 学号：XXXXXXXX 学院：XXXXXXXXXXXXX 班级: XXXXXXXXX 蛋白质的定量测定（BCA试剂盒法） 实验内容：蛋白质的定量测定 实验目的：求知蛋白液浓度 实验器材：96孔板、微版比色仪、酶标仪、定量移液器及吸头、离心管、H2O、WR、不同浓度的BSA标准品。 实验步骤 配制不同浓度蛋白标准品： 取0.5ml离心管6个，以96孔板为支架 离心管编号 1 2 3 4 5 6 蛋白终浓度(ug/ml) 800 400 200 100 50 25 H2O(ul) 160 100 100 100 100 100 4000ug/ml BSA(ul) 40 取管1中100 取管2中100 取管3中100 取管4中100 取管5中100 管1混匀后取100ul于管2中，依此倍比稀释 配制工作液 （标准品6个+空白1+待测1）·平行孔2个·200ul=3200ul 取10ml离心管1个 BCA Reagent 5ml Cu Reagent 100ul 加样：96孔板 H2O 800 400 200 100 50 25 待测 H2O 800 400 200 100 50 25 待测 每孔25ul不同浓度蛋白+200ul工作液，先加蛋白工作液 预温烘箱40℃ 40℃ 30min（盖盖孵育，以免蒸发），放至常温后，570nm读数 标准曲线绘制（Excel表） 第一组 0.791 0.396 0.199 0.071 0.064 0.008 0.472 第二组 0.814 0.411 0.215 0.077 0.054 0.011 0.358 吸光度X轴 0.8025 0.4035 0.207 0.074 0.059 0.0095 0.415 标准品浓度Y轴 800 400 200 100 50 25 Y=413.40 五、实验结果 溶液吸光度和浓度呈正比关系，待测样品吸光度平均值为X=0.415，则Y=413.40得出待测样品蛋白浓度为413.40ug/ml。