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性别控制技术的应用及推广 ——以流式细胞分离技术为例 汇报人：胡煜 指导教师：徐恢仲 2014.11.17 目录 1 2 3 4 5 研究背景与意义 概 述 应用举例 影响因素 小 结 国外 国内 2002年广西大学率先购买了流式细胞检索仪。至此，我国内蒙、新疆、黑龙江、天津等省纷纷引进该分离仪器仪器进行精子分离试验。目前主要在奶牛、羊、梅花鹿精子分离应用较多。 高庆华和魏海军2006年9月和2007年9月成功分离梅花鹿和马鹿精液。速度达每秒分离X、Y精子各4500个（V=4500个/秒）,纯度超过91%。 罗军和高庆华2007年8月成功分离莎能山羊精液，速度达每秒分离X、Y精子各4500个，纯度超过93%。 1.研究背景与意义 2000年英国cogent公司首先开始将性别分离精子投入商业用途中，并为其属下牧场提供奶牛分离精子的服务。至此，美国等也开始进行商业化生产。 Hasler等在超速排卵后利用流式细胞术分离精子，结合ET技术大批量产下了牛犊。（2003） fugger等利用流式细胞分离仪分离精子，使患有X连锁脑积水的患者怀孕，最终生下未患此病的女儿。同时，对332位病人进行IVF、IUI，使出生后代准确率为女儿94.4%，儿子73%。 ET:胚胎移植 IVF:试管婴儿 IUI:宫腔内人工授精 2.流式细胞分离法概述 发展史 1930年Caspersson?和Thorell?开始致力于细胞的计数； 1934年?Moldaven?是世界上最早设想使细胞检测自动化的人，他试图用光电仪记录流过一根毛细管的细胞数量； 1936年Caspersson等引入显微光度术； 1940年Coons?提出用结合了荧光素的抗体去标记细胞内的特定蛋白； 1947年?Guclcer?运用层流和湍流原理研制烟雾微粒计数器；? 1949年?Wallace?Coulter?提出在悬液中计数粒子的方法并获得专利； 1950年Caspersson用显微分光光度计的方法在紫外线（UV）和可见光光谱区检测细胞： 1953年?Croslannd-Taylor应用分层鞘流原理，成功地设计红细胞光学自动计数器； 1953年?Parker和Horst描述一种全血细胞计数器装置，成为流式细胞仪的雏形； 1954年?Beirne和Hutcheon发明光电粒子计数器； 1959年B型Coulter计数器问世； 1965年Kamemtsky等提出两个设想，一是用分光光计定量细胞成份；二是结合测量值对细胞分类； 1967年?Kamemtsky和Melamed在Moldaven的方法基础上提出细胞分选的方法； 1969年Van?Dilla，Fulwyler及同事们在 Los?Alamos，NM(即现在的National?Flow?Cytometry?Resource?Labs),发明第一台荧 光检测细胞计； 1972年??Herzenberg?研制出一个细胞分选器的改进型，能够检测出经荧光标记抗体染色的细胞的较弱的荧光信号； 1975年Kochler和Milstein提出了单克隆抗体技术，为细胞研究中大量的特异的免疫试剂的应用奠定了基础。 从此，大量厂家不断研制生产出各具特色的流式细胞仪，流式细胞术进入了一个空前飞速发展的时代 2.流式细胞分离法概述 作用原理 待分离精液 检测系统 充电（X正电Y负电） 精液滴分群（均匀） 荧光染色（X含量多Y含量少） 电场作用 Y精子 X精子 不偏离 无效精子 结构包括五个部分： 流动室及液流驱动系统 激光光源及光束形成系统 光学系统 信号检测、存储、显示分析系统 分类纯化系统 2.流式细胞分离法概述 基本概况 国内每支含2x106个精子的0.25mL普通奶牛细管X冻精的售价200-400元，性控人工授精成本比常规人工授精高10倍 目前以5X104个/秒速度分离X、Y精子（速度可以以分计算，也可以以秒计算） 流式细胞仪的制造商全球主要有三家：德国BD公司、美国贝克曼库尔特（Beckman Coulter）公司、加拿大Cytomation公司 售价:淘宝BD牌48万，上海伯乐7万美金 分选仪孔数：96孔、384孔、1536孔 3.应用举例 应用范围 　　在实际生产中，性别控制技术通过一定的干预使雌性动物按照人们的意愿生产特定性别的后代。通过性控，可以提高畜牧业的经济效益。消灭隐形的性疾病以及一系列连锁的疾病，从而加快珍稀动物的保种，育种以及繁育进程。 鹿茸 　 养殖茸鹿的主要目的是获得鹿茸，产茸性状受到性别因素的制约，公鹿产茸母鹿不产，而使动物生产与人类意愿一致性别的后代，则意