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急性经口毒性试验
1 目的
(1)检测消毒剂对实验动物的急性毒性作用和强度。
(2)为亚急(慢)性毒性等试验提供剂量选择的依据。
2 实验动物
小鼠或大鼠任选一种,雌雄各半。小鼠体重18g~22g,大鼠体重180g~220g,根据不同的计算LD50方法,选用适当的动物数量。
3 试验分组
如应用概率单位-对数图解法计算LD50,随机分为5个~6个剂量组。通常最高剂量组的动物死亡率应≥90%,最低剂量组动物死亡率应≤10%。可先以较大的组距较少量动物进行预试,找出其粗略致死剂量范围,然后再设计正式试验的剂量分组。
4 操作程序
(1)动物的准备:试验前,一般禁食过夜,不限制饮水。
(2)受试物的配制:常以水或食用植物油为溶剂配制成溶液,或采用0.5%羧甲基纤维素配制成混悬液。灌胃给予受试物的最大容量,小鼠不超过0.2ml/10g体重,大鼠不超过1.0ml/100g体重。
(3)染毒方法:用灌胃方式将受试物一次给予动物。若受试物毒性很低,一次灌胃容量太大,可在24h内分成2次~3次给予,其总剂量作为一日剂量计算。
(4)染毒后观察动物的中毒表现和死亡数及死亡时间,并对死亡动物和观察期满处死动物进行尸体解剖,肉眼观察,发现有异常的组织或脏器,尚需进一步作组织病理学检查。观察时间14d。
5 LD50 的计算方法
根据给受试物后14d内的各剂量组动物死亡率计算LD50 (半数致死剂量)。
5.1概率单位-对数图解法:
(1)根据各剂量组动物死亡率,从表2-9 中查各组的概率单位。因死亡率为 0% 和 100%的概率单位,与所试动物数有关,故需另在表2-10中查找。
例如:对死亡率为45%的概率单位,可查表2-9。先在表的左侧纵标目上找到 40,而后在表的上行横标目处找到5,两者交叉点处的4.87,即为45% 的概率单位。
又如:某组用 10 只实验动物,如果全部存活(死亡率为0%),查表2-10,其概率单位为 3.04。
表2-9 百分率-概率单位换算表
% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0 .. 2.67 2.95 3.12 3.25 3.36 3.45 3.52 3.59 3.66
10 3.72 3.77 3.82 3.87 3.92 3.96 4.01 4.05 4.08 4.12
20 4.16 4.19 4.23 4.26 4.29 4.33 4.36 4.39 4.42 4.45
30 4.48 4.50 4.53 4.56 4.59 4.61 4.64 4.67 4.69 4.72
40 4.75 4.77 4.80 4.82 4.85 4.87 4.90 4.92 4.95 4.97
50 5.00 5.03 5.05 5.08 5.10 5.13 5.15 5.18 5.20 5.23
60 5.25 2.28 5.31 5.33 5.36 5.39 5.41 5.44 5.47 5.50
70 5.52 5.55 5.58 5.61 5.64 5.67 5.71 5.74 5.77 5.81
80 5.84 5.88 5.92 5.95 5.99 6.04 6.08 6.13 6.18 6.23
90 6.28 6.34 6.41 6.48 6.55 6.64 6.75 6.88 7.05 7.33
注: 横标目数字为死亡率的个位数,纵标目数
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