实验培养基的使用特点和微生物接种方法.pptVIP

实验目的与要求 （p9/32) 强调无菌操作概念，掌握无菌操作技术 掌握微生物移植、纯化的基本方法 了解不同微生物在同一培养基上的培养特征，及同一微生物在不同培养基上的培养特征 掌握几种常用的鉴别、选择培养基的使用 了解显微测微尺的构造；掌握应用显微测微尺测量微生物细胞大小的方法与技术 本文档共31页；当前第1页；编辑于星期二\1点20分 微生物培养 Culture：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体 混合培养物：含有多种微生物的培养物； 纯培养物： 只有一种微生物的培养物； Pure culture 通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果 纯培养技术是进行微生物学研究的基础！ 本文档共31页；当前第2页；编辑于星期二\1点20分 一、用固体培养基分离纯培养 培养基： 液体培养基； 固体培养基； 1.5%-2.5% 半固体培养基； 0.2%-0.75% 琼脂 本文档共31页；当前第3页；编辑于星期二\1点20分 一、用固体培养基分离纯培养 菌落（colony）： 单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞生长群体 众多菌落连成一片 菌苔（lawn） 本文档共31页；当前第4页；编辑于星期二\1点20分 无菌操作： 火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行 本文档共31页；当前第5页；编辑于星期二\1点20分 不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征（形状、颜色等），可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据 本文档共31页；当前第6页；编辑于星期二\1点20分 菌落的描述：形态、表面和边缘特征 本文档共31页；当前第7页；编辑于星期二\1点20分 本文档共31页；当前第8页；编辑于星期二\1点20分 同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落 本文档共31页；当前第9页；编辑于星期二\1点20分 一、用固体培养基分离纯培养 使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法： 1、稀释倒平板法 2、涂布平板法 3、平板划线法 4、厌氧微生物的分离 本文档共31页；当前第10页；编辑于星期二\1点20分 本文档共31页；当前第11页；编辑于星期二\1点20分 一、用固体培养基分离纯培养 1、稀释倒平板法 2、涂布平板法 操作较麻烦，对 好氧菌、热敏感 菌效果不好！ 使用较多的常规 方法，但有时涂 布不均匀！ 本文档共31页；当前第12页；编辑于星期二\1点20分 利用L棒进行涂布 本文档共31页；当前第13页；编辑于星期二\1点20分 3、平板划线法 本文档共31页；当前第14页；编辑于星期二\1点20分 3、平板划线法 本文档共31页；当前第15页；编辑于星期二\1点20分 一、用固体培养基分离纯培养 4、厌氧微生物的分离 厌氧罐 厌氧手套箱 本文档共31页；当前第16页；编辑于星期二\1点20分 二、选择培养分离 抑制大多数其它微生物的生长； 使待分离的微生物生长更快； 对微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化 没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物 生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。 本文档共31页；当前第17页；编辑于星期二\1点20分 三、选择培养分离 1. 利用选择平板进行直接分离 待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制 高温下培养：分离嗜热细菌； 培养基中不含N：分离固氮菌； 培养基加抗生素：分离抗性菌； 本文档共31页；当前第18页；编辑于星期二\1点20分 1. 利用选择平板进行直接分离 颜色反应：分离特定的菌株； 牛奶平板：分离蛋白酶产生菌； 待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物 本文档共31页；当前第19页；编辑于星期二\1点20分 2. 富集培养 富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微生物的需要。 本文档共31页；当前第20页；编辑于星期二\1点20分 组成成分：乳糖、胆盐、柠檬酸铁、柠檬酸纳、煌绿、中性红、硫代硫酸钠等，强选择性抑制大肠杆菌，分离沙门菌 煌绿、胆盐、柠檬酸纳抑制非肠道菌 大肠杆菌分解乳糖而产酸，使胆盐析出，菌落中心浑浊呈深红色，柠檬酸铁可使产生硫化氢的菌落呈黑色 硫代硫酸钠缓和胆盐对沙门氏菌的有害作用，中和煌绿、中性红的毒性，使大肠杆菌的红色菌落更加鲜艳 S.S琼脂（沙门氏菌、志贺氏菌分离用培养基） 常用的选择培养基 本文档共31页；当前第21页；编辑于星期二\1点20分 麦康凯培养基 乳糖、胆盐，弱选择性，中性红,分离肠道