中药制剂检测技术第五章中药制剂的卫生学检查.pptVIP

第一节 微生物限度检查法 管1：1∶10供试液1ml 管2：1∶100供试液1ml 管3：1∶1000供试液1ml 管4：稀释剂1ml 4个装有10ml乳糖胆盐发酵培养基管1、2、3、4 + 18～24h 无菌生长，或有菌生长但不产酸产气 18～24h 产酸产气 判定该管未检出大肠菌群 曙红亚甲蓝琼脂或 麦康凯琼脂培养基 确证实验：乳糖发酵管 疑似 不产酸产气 18～24h 2. 大肠菌群(Coliform) 本文档共70页；当前第31页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 各供试品量的检出结果 可能的大肠菌群数N (个/g或ml) 或0.1ml 或0.01ml 或0.001ml ＋ ＋ ＋ ＞103 ＋ ＋ － 102＜N＜103 ＋ － － 10＜N＜102 － － － ＜10 结果判断与报告：根据大肠菌群的检出管数，按下表报告1g或1ml供试品中的大肠菌群数。 ＋代表检出大肠菌群；－代表未检出大肠菌群。 本文档共70页；当前第32页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 3.沙门菌(Salmonella) 供试品10g或10ml 不少于200ml的营养肉汤 18～24h 1ml 10ml四硫磺酸钠亮绿培养基 18～24h 胆盐硫乳琼脂(或沙门、志贺菌属琼脂)培养基 18～24h 麦康凯琼脂(或曙红亚甲蓝琼脂)培养基 18～24h 18～24h 三糖铁琼脂培养基 本文档共70页；当前第33页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 判定未检出该菌 1:10供试液10ml 100ml的胆盐乳糖培养基 18～24h 营养琼脂培养基斜面 18～24h 18～24h 氧化酶试验+革兰染色镜检 绿脓菌素(Pyocyanin)试验 阳性或G? 阳性 判定检出该菌 阴性或非G? 适宜的鉴定试验 阴性 4. 铜绿假单胞杆菌((Pseudomonas aeruginosa) 本文档共70页；当前第34页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 5. 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 革兰氏染色+血浆凝固酶试验 供试液10ml 18～24h 24～72h 24～72h 非G+球菌和血浆凝固酶试验阴性 判供试品未检出该菌 判供试品未检出该菌 100ml的亚碲酸钠(钾)肉汤(或营养肉汤) 卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露醇氯化钠琼脂培养基 营养琼脂培养基 无菌落生长 有菌落生长 本文档共70页；当前第35页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 6. 梭菌(Clostridium) 含庆大霉素的哥伦比亚琼脂培养基平板 革兰氏染色+过氧化氢酶试验 2份供试液10ml，其中一份置80℃保温10分钟后迅速冷却 48h 各0.2ml 厌氧条件 分别接种于100ml梭菌增菌培养基 厌氧条件 48～72h 非G+梭菌和过氧化氢酶试验阴性 判供试品未检出梭菌 无菌落生长 判供试品未检出梭菌 若有菌落生长 本文档共70页；当前第36页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 7. 白色念珠菌（Candida albicans） 念珠菌显色培养基 供试液10ml 48～72h 24～48h 镜检，染色+芽管试验 判供试品未检出该菌 100ml的沙氏葡萄糖液体培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 无菌落生长 有菌落生长 判供试品未检出该菌 聚山梨酯80-玉米琼脂培养基 绿色或翠绿色 无绿色或翠绿色 本文档共70页；当前第37页；编辑于星期一\12点30分 控制菌 检验试剂 阳性判断 验证用试剂或试验 大肠埃希菌 MUG试液 靛基质试液 荧光 玫瑰红色 曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂、乳糖发酵管 大肠菌群 乳糖胆盐发酵管 产酸产气 沙门菌 胆盐硫乳琼脂 麦康凯琼脂 菌落中心黑色 三糖铁琼脂 铜绿假单胞菌 乳糖胆盐培养基 溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 氧化酶试验 灰白色，周围时有蓝绿色素扩散 PDP琼脂培养基 金黄色葡萄球菌 亚碲酸钠(钾) 卵黄氯化钠琼脂 金黄色 血浆凝固酶试验 梭菌 梭菌增菌培养基 混浊、产气 过氧化氢酶试验 白色念珠菌 沙氏葡萄糖 沙氏葡萄糖琼脂 念珠菌显色培养基 乳白色，表面光滑有浓酵母气味 绿色或翠绿色 芽管试验 第一节 微生物限度检查法 总结 本文档共70页；当前第38页；编辑于星期一\12点30分 第一节 微生物限度检查法 （四）结果判断 供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。 供试品的细菌数、霉菌和酵母菌数其中任何一项不符合该品种项下的规定，应从同一批样品中随机抽样，单独复试两次，以3次结果的平均值报告均数。 供试品的细菌数、霉菌和酵母菌数、控制菌三项检验结果均符合该品种项下