动物实验质量监控.ppt

第八章; 第一节 动物实验设计 第二节 实验动物选择 第三节 动物实验结果的评价 及其意义;重点掌握内容 1、动物实验设计的基本类型 2、实验动物选择的原则 3 、成年实验动物的体重标准，慢性实验选择未成年实验动物的体重。 4 、影响动物实验的个体因素 5 、实验动物选择的基本意见 6、 GLP、SOP的概念。 ;第一节 动物实验设计;药物致早孕大鼠子宫出血模型的建立; 应用米非司酮配伍米索前列醇进行药物流产是目前终止早孕的主要方法之一, 具有口服简便、作用快、副作用轻、避免手术痛苦、减少并发症等优点。但药流后子宫出血量多和出血时间过长是其最大缺点。现在临床广泛尝试应用多种中药或西药防治药物终止早孕后的出血过多， 但缺乏实用的早孕流产后出血的动物模型来客观评价这类药物药效。我们将米非司酮配伍米索前列醇用于早孕大白鼠, 建立了早孕大白鼠子宫流产出血模型, 可用于药物筛选、药效评价。;2.2 　米非司酮配伍米索前列醇造型剂量选择　 以阴道出血情况和子宫病理形态变化考察不同剂量米非司酮配伍米索前列醇造型情况, 以确定最佳造型剂量。 2.3 　药效观察　 以最佳剂量造型后次日开始灌胃宫血宁, 灌胃剂量为0.13 g (胶囊内容物重)·kg-1 (相当于临床剂量的10 倍), 每天1 次, 连续7 d 。 2.4 　子宫出血量测定 2.5 　统计学处理　 计量资料用 x ±s 表示。t 检验进行组间比较。 ;3 　实验结果;3.2 　药效评价　 在前面实验基础上, 选择最佳造型剂量(米非司酮8.3mg·kg-1 +米索前列醇100 μg·kg-1)于d 7 造型, 孕鼠于次日均出现不同程度的阴道出血, 以后逐渐减少, 但形成少量淋漓出血状态, 1w 后仍未完全消失, 收集1 w 的阴道出血棉球, 进行每鼠每日的阴道出血情况观察, 并于每鼠d 14进行子宫出血量测定。正常组因有子宫分泌物被收集, 子宫分泌物呈淡黄色、无色不等, 故洗浸后比色有一定读数。模型组与正常组子宫每日出血量和7 d出血总量统计有显著差异, 阳性药物宫血宁治疗组子宫每日出血量和7 d 出血总量显著减少, 且能缩短出血天数。; 例如：研究某个终止早孕药物的作用 实验对象应选择早孕大鼠； 处理因素是指该终止妊娠药物的使用、统计学处理及实验条件的质量控制 实验效应则为早孕终止。;二、动物实验设计应遵循的原则;（一）、动物实验设计应遵循的伦理原则 ——“3R”原则 1、替代（replacement）原则—— 用低等或非实验动物代替高等实验动物； 2、减少（reduction）原则—— 尽可能减少实验动物的用量； 3、优化（refinement）原则—— 应优化实验设计和操作，减少实验动物痛苦。;（二）、对照性原则： 是要求在实验设计中设立可与实验组比较，用于消除各种无关因素影响的对照组。 实验组和对照组具有同等重要的意义。设置对照组是消除或减少非实验因素的干扰所造成误差的有效措施。 没有对照组的实验结果是难以使人信服的。 对照应有可比性,即在“同时同地同条件”下进行。;二乙基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化一肝癌动物模型的建立;;（三）、一致性原则;（四）、重复性原则;（1）一般估测的样本数 小动物(大鼠、小鼠、蛙、鱼)：每组10~30例,计量资料每组不少于10例, 计数资料每组不少于30例； 中等动物(豚鼠、家兔)：每组8~20例,计量资料每组不少于8例, 计数资料每组不少于20例 大动物(犬、猫、猪、羊等)：每组6-20例,计量资料每组不少于6例,计数资料每组不少于20例。;（2）按统计学方法测算的样本数 现介绍一种动物实验的样本含量计算公式： n=2б2(tα+tβ)2/δ2 式中，n为样本含量，б为标准差；tα取有显著性的t分布值，t0.05=1.96；tβ为无显著性的t分布值，1-β为实验检验能力，动物实验一般取1-β=0.80，t0.20=0.842；δ为处理组与对照组均值间的差异，可从预实验或文献资料库中获得。由上述参数可计算出正式实验所需样本含量。;举例如下： 给某种动物饲喂一种新型饲料，预实验中每月体重增长比原饲料增加30±15克（均值±标准差）。 设显著水平为95%，检验能力为80%，则正式实验所需样本含量n为： n=2×152×（1.96＋0.842）2/302 = 3.93 即每组只需4只动物。;（五）、随机性原则 随机性原则就是按照机遇均等的原则来进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差尽量减少，而不受实