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随着经济社会发展和人民生活水平的提高，人们对于食品、饮水等安全问题的日益重视，微生物检测领域的新技术新方法也日渐成熟，先进的检测设备和检测试剂让微生物检验变得如此简单，从酶底物法在国标中的应用范围逐渐扩大可见端倪。
GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法》微生物指标?新增酶底物法检测总大肠菌群和大肠埃希氏菌。
国家环境保护标准HJ1001-2018规定了测定水中总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的酶底物法。
GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法》新增酶底物法检测菌落总数。
酶底物法大肠菌群检测原理
总大肠菌群
37℃ 培养 24h，产生β-半乳糖苷酶，分解选择性培养基中的邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)生成黄色的邻硝基苯酚。
粪大肠菌群 （又称耐热大肠菌群）
44.5℃培养24h，产生β-半乳糖苷酶，分解选择性培养基中的邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)生成黄色的邻硝基苯酚。
大肠埃希氏菌 （俗称大肠杆菌）
37℃ 培养 24h，产生β-半乳糖苷酶，分解选择性培养基中的邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)生成黄色的邻硝基苯酚；同时产生β-葡萄糖醛酸酶，分解选择性培养基中的4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG）释放出荧光物质（4-甲基伞形酮）。
酶底物法检测因其操作简单、结果快速准确等特性，被食品药品监督管理局、海关总署、环境保护局、水质检测机构等认可并广泛应用于水中大肠菌群检测。
使用酶底物法进行大肠菌群定量检测时，需使用程控定量封口机对51孔定量盘、96孔定量盘或97孔定量盘进行封口。而传统的封口机预热时间长、封口缓慢且不平整，造成实验效率低，可能会影响检测结果的准确性。
为此环凯生物隆重推出：新一代 程控定量封口机??Elite Sealer。
★ 产品特点
★ 可靠性，无漏液，无破孔 ★ 稳定性，可检测50000个样品以上，使用寿命大于5年 ★ 方便性，有前进和后退键、有定量盘计数及计数清零、密码登录设置、温度补偿设置 ★ 彩色液品触摸显示屏，预热进度条实时显示界面 ★ 预热时间约4min ★ 噪音48dB(A) ★ 外罩温度40℃ ★ 封口速度51孔、97孔定量检测盘封口时间14秒/个 ★ 不需要无菌室，24h检测水中总大肠菌群/大肠埃希氏菌/粪大肠菌群
? 操作步骤
? 将加入酶底物法试剂的水样倒入定量盘中 ? 程控定量封口机封口 ? 放入恒温培养箱中恒温培养24小时 ? 根据显色情况统计阳性教量 ? 参照标准MPN表查出具体数值、
? 结果判读
1）在36℃培养24h 无色代表不含大肠菌群 黄色代表含有总大肠菌群 黄色且有荧光代表大肠埃希氏菌群阳性
2）在44.5℃培养24h 黄色代表含有粪大肠菌群
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