拟除虫菊酯杀虫剂品质检验—有效成分的测定.pptx

项目一：拟除虫菊酯杀虫剂品质检验液相色谱的流动相 作为液相色谱的“血液”，流动相有哪些要求呢？第一，所使用的主体试剂必须是HPLC级的。第二，流动相在使用前必须经超声脱气30分钟以上。由于流动相里含有微量空气，经泵的压力作用，会在流通池里产生气泡，这对分析产生一定的影响，如噪音增大，甚至于掩盖信号峰。 第三，流动相在使用前必须经0.45μm及以下的滤膜过滤。因为流动相里有很微小的垃圾，如不过滤的话，可能偶尔会卡在单向阀门中，从而产生压力波动。对此，可能很多用户都不会太在意，最终容易导致压力波动的产生。 1、溶剂的纯化 高效液相色谱用溶剂分为流动相用溶剂和空白溶剂。选择的溶剂一般应具有低粘度、高纯度、化学稳定性好，对样品有合适的极性和良好的选择性、与检测器兼容性强、低毒等特征。 由于高效液相色谱灵敏度高，对溶剂的纯度要求也高。不纯的溶剂会引起基线不稳，或产生“鬼峰”。痕量杂质的存在，即可使截止波长值大幅增加。同时色谱柱的寿命与溶剂纯度也有关，当含有大量杂质的溶剂流过色谱柱，杂质富集在色谱上极易造成色谱柱的堵塞。所以液相所用溶剂应尽量达到HPLC级，如果不能满足色谱分析要求，则要进行除去紫外杂质、脱水、重蒸等纯化操作。 1、溶剂的纯化 乙腈是常用的溶剂，分析纯乙腈中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯醇和噁唑等化合物，会产生较大的背景吸收，可以采用活性炭或酸性氧化铝吸附进行纯化，也可以采用高锰酸钾、氢氧化钠氧化裂解与甲醇共沸的方法进行纯化。 1、溶剂的纯化四氢呋喃中的抗氧化剂BHT（3，5－二特丁基－4-－羟基甲苯）可以通过蒸馏除去。四氢呋喃长时间放置又会被氧化，最好使用前先检查有无过氧化物。方法是取10mL四氢呋喃和1mL新配制的10%碘化钾溶液混合1min后，不出现黄色即可使用。 1、溶剂的纯化 正相色谱中使用的亲油性有机溶剂通常含有50～2000ug/mL的水。水是极性最强的溶剂，特别是对吸咐色谱，即使很微量的水也会因其强烈的吸咐而占领固定相中很多吸附活性点，致使固定相性能下降，通常可以用分子筛床干燥除去微量水。 2、流动相的过滤流动相过滤的目的 过滤去除可能存在的微小固体颗粒，保护色谱高压泵和色谱柱流动相过滤方法 在线过滤 抽真空过滤 2、流动相的过滤过滤瓶包括三角形集液瓶 (1000 毫升) 、砂芯过滤头、过滤杯 (300 毫升) 和固定夹细节放大组装过滤瓶套装真空泵 2、流动相的过滤 3、流动相的脱气流动相脱气的目的 使色谱泵的输液准确输液均匀准确，并且脉动减小保留时间及色谱峰面积的重现性提高 提高检测的性能防止气泡引起的尖峰基线稳定，信噪比增加溶剂的紫外吸收本底降低 保护色谱柱减少死体积防止填料的氧化 3、流动相的脱气常用的脱气方法有： 吹氦脱气法 加热回流法 抽真空脱气法 特点：可以一次完成过滤和脱气任务 注意：抽真空会引起混合溶剂组分的变化，适合单一溶剂体系 超声波脱气法 简单 在线真空脱气法 把真空脱气装置串接到储液系统，结合膜过滤器可以实现流动相的连续在线真空脱气 3、流动相的脱气 3、流动相的脱气 1、流动相过滤的作用保护色谱系统和色谱柱，延长柱子的使用寿命，改善数据的精确度2、过滤膜（微孔滤膜 Membrane）的选择适用性原则3、超声时间流动相性质决定（1）聚四氟乙烯滤膜（2）醋酸纤维滤膜（3）尼龙66滤膜（4）再生纤维素滤膜流动相是否一定要过滤？如何辨别一盒没有标签的滤膜？ 项目一：拟除虫菊酯杀虫剂品质检验色谱定性 什么是定性分析？目的：确定试样的组成，即确定每个色谱峰各代表何种组分依据：在一定固定相和一定操作条件下，每种物质都有各自确定的保留值或确定的色谱数据，并且不受其它组分的影响。也就是说，保留值具有特征性。注意：但在同一色谱条件下，不同物质也可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非是专属的。所以：对于一个完全未知的混合样品单靠色谱法定性比较困难，往往需要采用多种方法综合解决，例如与质谱仪、红外光谱仪等联用。 1、利用已知标准样品定性 利用保留时间定性 由于每一种化合物在特定的色谱条件下（流动相组成、色谱柱、柱温等相同），其保留值具有特征性，因此可以利用保留值进行定性。 1、利用已知标准样品定性加入标准物增加峰高 在得到未知样品的色谱图后，在未知样品中加入一定量的已知标准物质，然后在同样的色谱条件下，作已知标准物质的未知样品的色谱图。对比这两张色谱图，哪个峰增高了，则说明该峰就是加入的已知纯物质的色谱峰。 1、利用已知标准样品定性用相对保留值定性 相对保留值是在相同色谱操作条件下，组分与参比组分的调整保留值之比。相对保留值只受柱温和固定相性质的影响，而柱长、固定相的填充情