转基因动物课件.pptVIP

转基因动物; 80年代以来，分子生物学和哺乳动物胚胎工程学的迅速发展以及两个学科的互相渗透和联系，使基因可以在实验室条件下，从一个动物体内分离出来，进行增值修饰，再引入同种或异种动物胚胎中，并在个体发育中得到表达，形成转基因动物(Transgenic Animals) 。转基因动物的产生实现了人们构建具有目的性状的动物的意愿。;一、转基因动物的概念;二、转基因动物的研究概况;1980年，Gordon 将SV40以及HSV的TK基因整合后的质粒，用显微注射法注入小鼠受精卵的雄原核内，首次成功地获得了转基因小鼠。 1981年Constantini和 Wagner分别将家兔的?-珠蛋白基因和人类? -珠蛋白基因与疱疹病毒胸苷酸融合基因注射到小鼠受精卵的雄原核内，成功地获得了转基因小鼠。;1982年，Palmiter等将小鼠金属巯蛋白(MT)基因启动子片段和大鼠的生长激素（GH）基因的融合基因注入小鼠受精卵雄原核内，获得了超级小鼠“supermouse”;Brinsters growth hormone mouse;1985年Wagner等第一次使用逆转录病毒载体MMCV-neo感染ES细胞，用G418筛选转化细胞,制成嵌合体，以neo基因为探针检测，各分化组织中均有neo基因的表达。 1986年，Robertson等用MPSVmos neo逆转录病毒载体转化ES细胞，首次通过ES 细胞途径获得转基因动物。 ;1987年，Thomas和Sapecchi等首次利用可以正负选择的靶载体，通过同源重组，造成了内源Hprt-基因的突变，获得了内源Hprt-的突变转基因小鼠，并确定了进行定位整合使用靶载体的基本原则。 1990年，Pursel获得转小鼠乳清酸性蛋白(whey acidic protein,WAP）基因猪，基因在乳中表达了WAP。;把外源目的基因和具有标记neo基因的重组的病毒载体，用适当的方法使这个重组体转化ES细胞。 Lesch-Nyhan综合征 突变HPRT 人?2珠蛋白和?8Antilles no apparent ES cell 方法： (1)磷酸钙沉淀法 近不发生明显的重排； 转基因动物的构建方法包括: strong ES cell ?-地中海贫血 人?8基因 整合率较低，不易用于受精卵，而多用于 疾病名称 转移基因 4) 建立研究外源基因表达、调控的动物模型。 变，对这些突变进行表型分 析。 这被认为是遗传学研究中继连锁分析、体 用于Hprt? (次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）的ES细胞 3、用同系的DNA还是用非同系的DNA构建打 实现基因导入的速度快且操作简单，对DNA大小无限制（最大达250Kb）。 将致病基因或病毒基因导入动物，可研究 家族性淀粉状蛋白多发神经病变 突变人fransthyretin contribution;近年来通过转基因奶山羊，得到高产量生产抗α-肿瘤坏死因子的抗体，用于风湿性和类风湿性关节炎的根治。 2002年，Masaru Okabe 实验室成功建立了第一个应用RNAi的转基因小鼠。这种转基因小鼠体内能产生特异针对GFP的siRNA，可以在GFP转基因小鼠全身各个组织内敲低GFP的表达。 ;三、转基因动物的原理及应用;（一）转基因动物的基本原理：;（二）转基因动物技术的应用;1、研究基因的结构和功能;2.研究发育过程中基因的特异性表达;3、遗传性疾病的研究;HBV转基因小鼠：对HBV基因在不同组织中表达及其表达产物的生物学效应分析，研究HBV在人体内的生活史和致病机理，进行乙肝药物的筛选。 侏儒小鼠 (dwarflit mice)：人生长激素缺陷I型模型，由生长激素等位基因隐性突变引起。 高血压动物模型 转基因猴“安迪”：导入了海蜇绿色荧光蛋白基因。;2001 The first pet was cloned. The kitten was named CC. Cats have a feline AIDS that is a good model for studying human AIDS;Phenotype of Ets2 transgenic mice;5.37 g;heart;a;Mouse Models of Obesity;已建立的遗传病转基因动物模型;4、培育动物新品种;5.构建转基因动物—生物 反应器（Bioreactor); anti-thrombin III (to treat intravascular coagulation) 抗