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(6)、80S起始复合物: Translation domain Exit domain menbrane Exit site P site A site mRNA site 60 Nt 本文档共51页;当前第30页;编辑于星期三\15点32分 (7)、真核生物起始复合物的特点: A、18S序列上没有与mRNA上互补的序列; B、mRNA 3′端的poly(A)尾的存在可刺激5′端起始复合物的形成,从而提高翻译效率。这一过程需要poly(A)结合蛋白; C、40S小亚基与mRNA5’端帽子结构的结合需要起始tRNA(tRNAi)的协助。 D、40S起始复合物对向蛋白质合成起始位点滑动的过程中需要解开发卡二级结构。移动的过程需要ATP提供能量。 E、起始Met-tRNAi位于起始80S复合物的P位点。 本文档共51页;当前第31页;编辑于星期三\15点32分 二、多肽链的延伸: (一)、原核生物多肽链的延伸 1、氨酰-tRNA进入核糖体A位点 (1)、三元复合物的形成: 二元复合物EF-Tu-GTP 与氨酰-tRNA 结合形成三元复合物:氨酰-tRNA-EF-Tu-GTP。 (2)、三元复合物进入A位点: A、反密码子的尾部结合到30S 亚基的A位点上。 B、密码-反密码的识别引发EF-Tu 结构的变化,促使tRNA 的CCA 尾部移入50S 亚基的A 位点内。然后GTP被水解为GDP,二元复合物EF-Tu-GDP 被释放。 本文档共51页;当前第32页;编辑于星期三\15点32分 (3)、EF-Tu-GTP的再生: 唯一不能被EF-Tu-GTP识别的氨酰tRNA是N-甲酰甲硫氨酰tRNA,这种排斥作用保证了fMet-tRNAf不能与内部密码子AUG或GUG结合。 EF-Tu-GDP是在EF-Ts的帮助下实现再生的。 本文档共51页;当前第33页;编辑于星期三\15点32分 (4)、GTP水解对肽键形成的影响: 肽键的形成需要GTP水解为GDP: 为研究GTP 在三元复合物中的作用,有人用不能被水解的GTP类似物GMP-PCP代替GTP。 在GMP-PCP 存在的条件下,三元复合物(AA-tRNA-EF-Tu- GMP-PCP)可以形成,氨酰-tRNA也能进入到核糖体A位点。但肽键不能形成。 本文档共51页;当前第34页;编辑于星期三\15点32分 肽键的形成需要EF-Tu-GDP从A位点的释放: 黄色霉素(Kirromycin)是一种能抑制EF-Tu 功能的抗生素。当EF-Tu 被黄色霉素结合时,它仍保留与氨酰-tRNA 结合并使之进入A 位点的功能。但EF-Tu-GDP 复合物不能从核糖体上释放。这使肽酰-tRNA 和氨酰-tRNA 之间的肽键无法形成。 (5)、EF-Tu-GDP的释放对肽键形成的影响: 本文档共51页;当前第35页;编辑于星期三\15点32分 氨基酸进位需延伸因子:Ts、Tu,还要 消耗GTP。EF-Tu与GTP和氨酰-tNRA首先形成三元复合物,才能进入A位。 总结: 原核生物氨酰-tRNA进入核糖体的A位的过程: 本文档共51页;当前第36页;编辑于星期三\15点32分 本节的主要内容 1、原核生物以及真核生物蛋白质生物合成过程:包括起始,延伸,终止; 2、保证蛋白质正确合成的机理; 本文档共51页;当前第1页;编辑于星期三\15点32分 植物细胞中蛋白质合成的部位 More than 20,000 proteins 50-100 30-40 本文档共51页;当前第2页;编辑于星期三\15点32分 一、蛋白质合成的一般特征: 蛋白质生物合成的方向:N端→C端; mRNA的转录方向:5ˊ→3ˊ 蛋白质合成除需要aa,核糖体,mRNA,tRNA外,还需要ATP、GTP,一系列辅助因子。 本文档共51页;当前第3页;编辑于星期三\15点32分 二、蛋白质合成的过程 1、氨基酸的活化; 2、蛋白质合成的起始; 3、蛋白质合成的延伸; 4、蛋白质合成的终止; 本文档共51页;当前第4页;编辑于星期三\15点32分 (一)、氨基酸的活化: 1、E.Coli氨基酸的活化: 由高度特异的氨酰-tRNA合成酶 (aminoacyl-tRNA synthetase)催化,反应分两步: 第一步: 本文档共51页;当前第5页;编辑于星期三\15点32分 总反应式 第二步: 总反应式: 2、真核生物的氨基酸的活化与原核生物相同。 本文档共51页;当前第6页;编辑于星期三\15点32分 生成的氨酰-tRNA的化学结构 本文档共51页;当前第7页;编辑于星期三\15点32分 生成的氨酰-tRNA的空间
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