第十三蛋白质生物合成.pptVIP

五、真核生物蛋白质的生物合成 核糖体更大，80S ? 40S+60S 起始tRNA和氨基酸 起始氨基酸为甲硫氨酸，而不是甲酰甲硫氨酸，起始tRNA表示为tRNAiMet，起始氨酰-tRNA为Met- tRNAiMet 起始密码子为AUG，它的上游5‘端无富含嘌呤序列（SD），一般在mRNA5’-末端的AUG为起点。真核生物mRNA通常只有一个AUG密码子，每种mRNA只转译出一种多肽。 本文档共84页；当前第63页；编辑于星期三\14点7分 对抑制剂敏感性不同，如亚胺环己酮只作用于80S核糖体，只抑制真核生物的翻译,白喉毒素与EF-2结合，抑制肽链移位。 真核中涉及的蛋白因子较多，有约13种起始因子、两种延伸因子、一种终止因子——被称为信号释放因子（eRF）。 蛋白质激酶参与真核生物蛋白质合成的调节。 真核中线粒体、叶绿体能进行蛋白质合成，其抑制剂与原核相似。 本文档共84页；当前第64页；编辑于星期三\14点7分 六、肽链合成后的加工和折叠 1. 水解 N末端的(甲酰)甲硫氨酸的切除 在去甲酰酶催化下将肽链合成的起始氨基酸-甲酰甲硫氨酸水解脱掉甲酰基，以便肽链形成所需的构象。 在氨肽酶催化下切去N末端一个或几个氨基酸。 多肽链还未释放时，上两个过程已发生。而真核生物15-30氨基酸时，就已开始上 述过程。 水解断裂 如动物体中蛋白酶形成的是无活性的酶原，到消化道后，水解切下一部分肽链，使酶原变成有活性的酶。 本文档共84页；当前第65页；编辑于星期三\14点7分 2. 氨基酸侧链的修饰 脯氨酸、赖氨酸侧链发生羟基化作用。 苏氨酸、丝氨酸、酪氨酸羟基磷酸化。如糖原磷酸化酶 糖基化作用使蛋白质多肽链转变成糖蛋白（N-糖苷键和O-糖苷键）。 3. 加辅基 结合上辅基（酶）才具生物活性，如乙酰辅酶A羧化酶与生物素的结合。 4. 二硫键的形成 两个半胱氨酸-SH氧化 本文档共84页；当前第66页；编辑于星期三\14点7分 一、氨基酸的活化 氨基酸在掺入肽链前必须活化，在胞液中进行。 氨基酸的活化是指各种参加蛋白质合成的AA与携带它的相应的tRNA结合成氨酰-tRNA的过程。活化反应在氨酰-tRNA 合成酶的催化下进行。 氨基酸 相应的tRNA + 氨酰－tRNA 氨基酸活化： 氨酰-tRNA 合成酶 本文档共84页；当前第31页；编辑于星期三\14点7分 1. 活化 ： AA-AMP-E复合物的形成 E-CR1-C-O ~P-O- CH2 = O OH - O 腺嘌呤 OH OH O NH2 AA+ATP+E AA-AMP-E +PPi Mg 2+ Mn 2+ 2. 转移 AA-AMP-E+ tRNA 氨酰-tRNA +AMP+E P P P C C A 高能酸苷键 O C-C-R O H NH2 OH 2?-OH连接氨基酸，影响下一步肽键形成 本文档共84页；当前第32页；编辑于星期三\14点7分 氨基酸活化图示 本文档共84页；当前第33页；编辑于星期三\14点7分 本文档共84页；当前第34页；编辑于星期三\14点7分 本文档共84页；当前第35页；编辑于星期三\14点7分 氨基酸活化的总反应式是： 氨基酸+ATP+tRNA +H2O ??氨酰-tRNA+AMP+PPi 20种氨基酸中每一种都有各自特异的氨酰-tRNA合成酶。氨酰-tRNA合成酶具有高度的专一性，它既能识别相应的氨基酸（L-构型），又能识别与此氨基酸相对应的一个或多个tRNA 分子；即使AA识别出现错误，此酶具有水解功能，可以将其水解掉。这种高度的专一性保证了氨基酸与其特定的tRNA准确匹配，从而使蛋白质的合成具有一定的保真性。 氨酰-tRNA 合成酶 tRNAIle——携带Ile的tRNA Ile- tRNAIle——异亮氨酰-tRNAIle 氨酰-tRNA合成酶和与之相对应的tRNA分子被称为遗传密码第二 本文档共84页；当前第36页；编辑于星期三\14点7分 Gln-tRNA synthetase (type I, monomeric) Asp-tRNA synthetase (type II, dimeric) Anticodon arm Amino acid arm ATP 本文档共84页；当前第37页；编辑于星期三\14点7分 tRNA与多肽合成的有关位点 3’端-CCA上AA接受位点 识别氨酰-tRNA合成酶位点 核糖体识别位点 反密码子位点（识别mRNA上的密码子） 本文档共84页；当前第38页；编辑于星期三\14点7分 3‘ 5‘ AUG AUG AUG 二、肽链合成的起始