三种血小板生成关键因子共转染人骨髓基质细胞的实验研究的中期报告.docxVIP

三种血小板生成关键因子共转染人骨髓基质细胞的实验研究的中期报告 摘要： 血小板（platelet）是人体中一种特殊的血细胞，其主要功能为血凝和止血。血小板的生成和释放受到多种因素的调控，其中包括血小板生成增强因子（thrombopoietin，TPO）和血小板生成素（megakaryocyte growth and development factor，MGDF）等。本研究旨在探讨三种关键血小板生成因子（TPO、MGDF和血小板因子4，PF4）的共转染对人骨髓基质细胞（bone marrow stromal cell，BMSC）的影响。 材料与方法： 1.采用胶体金法共转染三种血小板生成关键因子到BMSC； 2.利用实时荧光定量PCR技术检测BMSC中多种相关基因的表达水平，包括血小板相关基因（CD41、GPIX、PF4）、骨组织基因（COL1A1、BSP、ALP）以及细胞增殖相关基因（PCNA、Ki-67）； 3.利用流式细胞术检测BMSC表面标志物的表达情况，包括CD34、CD45、CD90和CD105； 4.采用酶联免疫吸附实验（ELISA）分析BMSC上清中TPO、MGDF和PF4的表达水平。 结果： 1.共转染TPO、MGDF和PF4可以显著促进BMSC中CD41、GPIX和PF4等血小板相关基因的表达； 2.共转染TPO、MGDF和PF4也可以显著促进BMSC中COL1A1、BSP、ALP等骨组织基因的表达，但不影响BMSC中PCNA和Ki-67等细胞增殖相关基因的表达； 3.共转染TPO、MGDF和PF4并未影响BMSC表面标志物CD34、CD45、CD90和CD105的表达水平； 4.BMSC在共转染TPO、MGDF和PF4后上清中TPO、MGDF和PF4的表达水平均有较明显提高。 结论： 三种血小板生成关键因子共转染可以促进BMSC中血小板和骨组织相关基因的表达，但对其增殖及生长趋势未产生影响。此外，共转染同样可以提高BMSC上清中TPO、MGDF和PF4的表达水平，为进一步研究BMSC在血小板生成中的作用提供了实验依据。