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影响血液凝固的因素 1 【实验目的】 观察某些因素对血液凝固的影响 【实验原理】 血液凝固过程中必须较多因子的参与， 因此血液凝固受许多因素的影响，除凝血 因子可直接影响血凝过程外，血凝还受接 触面、温度等影响。 2 血液凝固(blood coagulation) 概念： 血液从流动 的溶胶状态转变成不 能流动的凝胶状态的 过程 本质： 可溶的纤维 蛋白原变为不溶的纤 维蛋白并交织成网， 网罗血细胞等成分形 成凝血块。 3 血液的凝固是由一系列凝血因子参与的复杂的蛋白 质酶解过程 凝血因子(coagulation factor) • 凝血因子是无活性酶原，有限水解才具活性。 • 除Ⅳ因子(Ga2＋)外其余多为蛋白质，在肝合成，其中Ⅱ、 Ⅶ、Ⅸ、 Ⅹ的合成必须有VitK参与。 • Ⅲ存在于组织中，其它因子均在血浆中。 • Ⅱ 、Ⅶ、Ⅸ、 Ⅹ 、Ⅺ、Ⅻ都是丝氨酸蛋白酶，能对特定 肽链有限水解。 • Ⅲ、 Ⅴ 、Ⅷ在反应中起辅因子的作用，可使相应丝氨酸 蛋白酶凝血因子的催化速率增快上万倍。 • 不能从肾小球滤过，降解和失活在肝脏完成。 4 内源性激活途径 (Ⅻ) 外源性激活途径 (Ⅲ) 凝血酶原激活物 血液凝固的过程 纤维蛋白原 凝血酶 纤维蛋白 凝血酶原 6 表面激活 + 7 外源性凝血途径在凝血的启动中起 关键作用，组织因子是凝血反应过程的 启动物。 “截短的”内源性凝血途径在放大阶 段对凝血反应开始后的维持和巩固起 重要作用。 8 血清中缺乏凝血因子和纤维蛋白原， 但增加了少量凝血过程中血管内皮和血 小板释放的物质。 血浆和血清： 9 血液凝固的控制 1.血管内皮抗凝作用 2.血液的稀释、纤维蛋白吸附及单核巨嗜 细胞的吞噬作用 3.生理性抗凝物质 ü丝氨酸蛋白酶抑制物 ü蛋白质C系统 ü组织因子途径抑制物(TFPI) ü肝素 10 纤维蛋白的溶解 纤溶系统： 纤维蛋白(原)在纤维蛋白溶 解酶的作用下降解为纤维蛋白降解物(FDP) 而分解液化的过程。 纤溶生理意义： ①保持血流通畅，血液处于流动状态 ②维持血管正常通透性 ③维持血液凝固与纤溶的动态平衡 11 纤溶的两个基本阶段： 纤溶酶原的激活； 纤维蛋白(纤维蛋白原)的降解 纤溶酶原激活物 纤溶酶原激活物抑制剂 纤维蛋白(原) 纤维蛋白(原)降解产物 纤溶酶抑制剂 纤溶酶原 纤溶酶 12 尿激酶型纤溶酶原激活物： 肾小管、集合管产生，在组织 修复、伤口愈合过程中，血管 外促进纤溶。 组织型纤溶酶原激活物(t-PA) ： 血管内皮合成，发挥局部溶栓 作用，保持血流通畅。 纤溶酶原 激活物 纤溶酶原的激活： 13 注意： (1)凝血是一个正反馈机制，一旦启动，必 迅速完成全过程。 (2) Ca2+在多个环节起作用，因此控制Ca2+就 能控制血凝。 (3)血凝过程是流水线，阻断其中一步，则 凝血过程必终止。 14 【实验对象】 家兔 【实验器材与药品】 哺乳动物实验手术器械一套、 20ml注射 器1副、 小烧杯2个、竹签、 清洁小试管6支、 水浴装置一套、冰块、棉花、石蜡油、滴 管、肝素、草酸钾、 0.025mol/LCaCl2溶 液、肺组织浸液、富血小板血浆、少血小 板血浆、 生理盐水 15 【实验步骤和观察项目】 1.麻醉： 1.5%戊巴比妥钠耳缘静脉注射 麻醉，剂量2ml/kg体重 2.固定、备皮 气管插管 3. 手术 颈总动脉插管。 16 实验条件 凝血 所需时间 加棉花少许 用石蜡油润滑试管表面 保温于37℃水浴糟中 放置于冰浴糟中 加肝素8单位(加血后摇匀) 4.做好准备工作：按下2表做好各试管的准备、 人员分工、计时等。 表一 影响血凝的理化因素 加草酸钾1~2mg(加血后摇匀) 17 5.取血：打开动脉夹，经颈动脉插管放 血入各试管，每支试管各采血约1.5ml(一 定要一次性采血完毕，多次放血可能会出 现血液凝固于插管内而不能再放血)，注意 及时计时并将各试管尽快置于其实验条件 下，如摇匀、放入温浴槽、冰浴槽内等。 18 6.实验观察 每隔30s将各试管轻轻倾斜一次，观察 其中的血液是否已凝固，发现其中的血液 已呈凝胶状而不再流动时记录其时间，最 后计算出各试管血液凝固所需的时间(在本 实验条件下，如超过30分钟血液仍未凝则 视为“不凝”)。 19 试剂 1 2 试管号 3 富血小板血浆(ml) 少血小板血浆