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* 红细胞血型血清学检测技术 盐水凝集法 低离子强度盐水法 酶技术 凝聚胺技术 抗人球蛋白检测法 柱凝集技术检测法 本文档共65页;当前第31页;编辑于星期日\9点59分 * 一、盐水凝集法 红细胞和抗血清在盐水溶液中直接反应 特点是操作简便,设备简单,缺点是影响因素多,灵敏度低 孵育30分钟 本文档共65页;当前第32页;编辑于星期日\9点59分 * 二、低离子强度盐水法 通过降低介质溶液的离子强度,减少红细胞外围离子云的强度,促进IgG分子在两个红细胞间桥联,而促进凝集 特点是缩短抗原抗体反应时间,提高反应灵敏度 孵育1分钟 本文档共65页;当前第33页;编辑于星期日\9点59分 * 三、酶技术 利用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面唾液酸,使红细胞失去电荷,缩小细胞间距离 同时改变红细胞膜表面结构,使某些隐蔽的抗原暴露,从而增强凝集反应 主要用于一些不完全抗体的检测 本文档共65页;当前第34页;编辑于星期日\9点59分 * 四、凝聚胺技术 利用多聚季胺盐在介质溶液中产生大量正电荷中和红细胞表面的负电荷,减少红细胞间排斥,促进凝集 本文档共65页;当前第35页;编辑于星期日\9点59分 * 五、柱凝集技术检测法 是微柱凝集技术与上述所有技术相结合的产物 1986年由法国人Dr.Yves Lappierre发明 1994年获得美国FDA认证,目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床 柱凝集技术原理 本文档共65页;当前第36页;编辑于星期日\9点59分 * 六、抗人球蛋白试验Coombs试验 在盐水凝集法或低离子强度盐水法的基础上,加入抗人球蛋白抗体,通过抗人球蛋白抗体的特异性桥连作用,促进红细胞的凝集 本文档共65页;当前第37页;编辑于星期日\9点59分 * + Anti-Human Globulin (AHG) 试剂 致敏红细胞的IgG抗体 或补体成份 加入抗人球蛋白试剂后 形成肉眼可见的凝集反应 抗人球蛋白实验 本文档共65页;当前第38页;编辑于星期日\9点59分 * 抗人球蛋白实验 1. 红细胞致敏反应 2. AHG反应 肉眼不可见 肉眼可见 本文档共65页;当前第39页;编辑于星期日\9点59分 * 直接抗人球蛋白实验(DAT) 红细胞在体内(in vivo)即被不规则抗体所致敏,因此直接加入抗人球试剂即可进行测定;如某些过敏性药物及引起溶血性输血反应的抗体、自身抗体等 间接抗人球蛋白实验(IDAT) 红细胞在体外(in vitro)首先被不规则抗体或抗血清试剂所致敏,然后再加入抗人球试剂进行测定;如抗体筛查、抗体鉴定、交叉配血等 抗人球蛋白实验 本文档共65页;当前第40页;编辑于星期日\9点59分 * 医院输血科的主要职责 提供临床所需的血液成份 提供血型相符或配合的血液 为临床提供血型相关的检测诊断 本文档共65页;当前第41页;编辑于星期日\9点59分 * 输血前测试流程 本文档共65页;当前第42页;编辑于星期日\9点59分 * sbc.org 常用输血前测试方法 1. 平板法 - 细胞浓度适宜,避免交叉污染,及时观察结果 2. 试管法 - 加样顺序,反应条件,洗涤细胞注意事项 3. 微量板法 - 加样和振荡避免交叉污染 4. 柱凝集法 - 避免假阳性,使用前观察凝胶板 本文档共65页;当前第43页;编辑于星期日\9点59分 * ABO血型鉴定 Rh血型鉴定 红细胞血型抗体筛查/鉴定 交叉配血试验 HDN血型血清学检查 常用输血前检测项目 本文档共65页;当前第44页;编辑于星期日\9点59分 * 方法: 红细胞凝集试验 正定型 用已知抗-A或抗-B定型试剂来测定红细 胞上有无相应的A抗原或/和B抗原 反定型 用已知A1型细胞和B型细胞来测定血清中 有无相应的抗-A或/和抗-B 正反定型结果不一致或有疑问,需进一步行ABO血型确认试验。 ABO血型鉴定 本文档共65页;当前第45页;编辑于星期日\9点59分 * ABO血型鉴定正常反应结果 血型 抗-A 抗-B A型红细胞 B型红细胞 A + - - + B - + + - AB + + - - O - - + + 本文档共65页;当前第46页;编辑于星期日\9点59分 * Rh血型鉴定 原理: Rh血型系统最常见的抗原主要有C,c,D,E,e 5种。 可分别用抗C、抗c、抗D、抗E、抗e这5种Rh 定型试剂通过血凝试验来检查红细胞上是
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