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比移值（Rf值）:用来表征斑点位置的基本参数是保 留因子，通常称作比移值，用Rf表示。 本文档共70页；当前第29页；编辑于星期一\1点52分 显色方法 日光下观察,划出有色物质的斑点位置 在紫外灯下(254nm或365nm),观察有无荧光的产 生,用硅胶G板 荧光淬灭法,适用于有紫外吸收的物质，用GF254板 显色剂显色,破坏性检出方法 本文档共70页；当前第30页；编辑于星期一\1点52分 常用显色剂 硫酸 硫酸-水；硫酸-甲醇/乙醇； 0.5%碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色 中性0.05%高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡 红色背景上显黄色 碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景 上显黄色 本文档共70页；当前第31页；编辑于星期一\1点52分 优点： 设备简单、操作方便、运行费用低； 分离时间短，工作效率高； 展开剂选择范围广，展开方式多样； 显色方便，检测手段丰富； 既可分析，又可制备； 试样一般不需要经过严格预处理即可分离。 缺点： 分离效率较低；不适用挥发性试样分离；定性定量不便。 本文档共70页；当前第32页；编辑于星期一\1点52分 TLC的应用 1. 用于柱层析后相同组分的合并 2. 有机合成监控反应，摸索最佳条件 3. 制备有机化合物 4. 中药材的鉴定 在中华人民共和国药典中，共有超过约600种化学合成药和超过约400种中药的质量控制应用了高效液相色谱的方法。 本文档共70页；当前第33页；编辑于星期一\1点52分 5.色谱分离的应用 薄层色谱（TLC） 气相色谱法（GC） 高效液相色谱（HPLC） 典型制备色谱 本文档共70页；当前第34页；编辑于星期一\1点52分 1953年阿切尔·马丁和A.T.詹姆斯发明了气相色谱法。 本文档共70页；当前第35页；编辑于星期一\1点52分 GC：以气体（即载气）为流动相的柱色谱 分离技术。 GC中常用作的载气的气体有N2、 He、 H2、 Ar，均为惰性气体。 GC载气的功能仅仅是携带试样、洗脱组分。 GC的选择性主要取决于固定相和组分分子 间的作用，所以可通过改变固定相来改变 GC的选择性。 气相色谱仪-GC 本文档共70页；当前第36页；编辑于星期一\1点52分 气相色谱仪流程（图） 气路系统 进样系统 分离系统（色谱柱系统） 检测系统 数据处理和控制系统（含温控系统） 本文档共70页；当前第37页；编辑于星期一\1点52分 样品 进样汽化 色谱柱分离 检测器 信号记录 载气 本文档共70页；当前第38页；编辑于星期一\1点52分 进样系统 由进样器和气化室构成。 液体样品—微量注射器 气体样品—六通阀、微量注射器 气化室温度：要保证样品瞬间、完全气化，一般高于沸点50℃以上，但也不宜太高，以防分解 本文档共70页；当前第39页；编辑于星期一\1点52分 柱温的选择 柱温应低于固定液的最高使用温度；柱温过高，易造成固定液流失、检测器噪声变大、基线漂移。 柱温一般选择接近或略高于组分的平均沸点。 降低柱温可在一定程度内改善分离；升高柱温可加快分析速度。 组分复杂，沸程宽（80-100℃）的试样，采用程序升温。 本文档共70页；当前第40页；编辑于星期一\1点52分 对检测器的要求 稳定性好、噪声低； 灵敏度高； 线性范围宽； 死体积小，响应快 本文档共70页；当前第41页；编辑于星期一\1点52分 噪声和漂移 噪声（N） ：在没有样品进入检测器时，基线在短期内发生的波动。 噪声的来源：固定液的流失、载气的不纯，电子元件不稳定、温度变化、外磁场干扰等。 基线漂移：基线在一定时间内产生的单向、缓慢移动。 良好的检测器其噪声与漂移都应很小。 本文档共70页；当前第42页；编辑于星期一\1点52分 GC的特点 1.优点 分离效率高（填充柱上千块塔板） 分析速度快 样品用量少（检测限低，高灵敏检测器） 2.缺点：（约20%样品适用） 样品须能气化（350℃下有一定的挥发性） 热稳定性要好 定性困难 本文档共70页；当前第43页；编辑于星期一\1点52分 5.色谱分离的应用 薄层色谱（TLC） 气相色谱法（GC） 高效液相色谱（HPLC） 典型制备色谱 本文档共70页；当前第44页；编辑于星期一\1点52分 高效液相色谱仪 高效液相色谱是20世纪60年代末发展的一种以液体为流动相的色谱技术。 特点如下： 高压 一般可达（150~350）×105 Pa 高速 一般可达1~10mL/min 高效 高灵敏度 分析时使用样品少 一般仅几毫升 本文档共70页；当前第45页；编辑于星期一\1点52分 高效液相色谱仪流