新版凝血因子ⅧⅨ抑制物诊断与治疗中国指南.docxVIP

必威体育精装版凝血因子VⅢ/IX抑制物诊断与治疗中国指南

近年来，无论是获得性凝血因子VⅢ(FVⅢ)/凝血因子IX(FIX)抑制物(也称获得性血友病)还是血友病患者合并抑制物均有增多的趋势。前者是非血友病患者产生的抗FVI/FIX自身抗体，后者是血友病患者接受外源性凝血因子产品输注后产生的抗FVⅢ/FIX同种抗体。重型血友病A患者抑制物发生率约为30%,非重型为3%~13%,而血友病B患者为1%~6%。为了规范国内同行的诊疗行为并为有关部门制定政策提供依据，我们曾先后制订了相关中国专家共识。为进一步提高我们对FVI/FIX抑制物的认识，做到发

现及时、处理正确，特制订此指南供国内同行参考。

基本概念

FVⅢ/FIX抑制物滴度：不同稀释度的患者血浆与正常血浆等量混合，孵育2h,测定残余FVⅢ/FIX活性。能使正常血浆FVI/FIX活性减少50%时，FVⅢ/FIX抑制物的含量为1个Bethesda单位(BU),此时患者血浆稀释度的倒数即为抑制物滴度，以”BU/ml血浆”表示。2001年国际血栓与止血学会(ISTH)规定：抑制物滴度5BU/ml为高滴度抑制物，抑制物滴度≤5BU/ml为低

滴度抑制物。

高反应者：输注凝血因子后抑制物滴度升高至5BU/ml以上的患者。

低反应者：输注凝血因子后抑制物滴度仍小于5BU/ml的患者。

暴露天数：患者实际接受凝血因子替代治疗的天数之和，不包括其间的间

隔天数。

FVⅢ/FIX抑制物实验室诊断

1.抑制物筛选(以FVⅢ为例):

采用部分激活的凝血活酶时间(APTT)纠正试验，用正常混合血浆(至少20人份健康人血浆)和患者血浆按1:1混合，即刻测定混合后的APTT,并与正常混合血浆和患者血浆的APTT进行比较，若不能纠正应考虑可能存在抑制物[纠正：超过正常混合血浆5s以内(或延长15%)或在实验室正常参考范围内；不纠正：超过正常混合血浆5s以上(或延长15%)或高于实验室正常参考范围。由于试验的复杂性，在判定纠正与否方面没有统一的共识，因此每个实验室需根据自身的经验建立相应的指南和纠正的标准与相应的解释。由于FVⅢ抑制物有时间依赖性，因此若患者延长的APTT即刻被正常混合血浆纠正，则需要进一步进行孵育后的纠正试验。具体步骤见图1。而若将正常混合血浆与患者血浆以1:4混合进行上述试验，

有助于发现微量抑制物。

结果解释：①APTT3、APTT6与APTT7均纠正提示凝血因子缺乏，不存在抑制物；②APTT3与APTT7均纠正、APTT6延长，提示抑制物存在且为时间

依赖性；③APTT3、APTT6与APTT7均不纠正、APTT6比APTT7延长不超过

10%~15%,提示存在抑制物，但抑制作用不存在时间依赖性；若APTT6比APTT7延长超过10%~15%,则抑制作用有时间依赖性；④APTT4、APTT5、

APTT6分别为APTT1、APTT2、APTT3的平行对照

2.抑制物的滴度(以FVⅢ为例):

确诊抑制物必须测定抑制物滴度。以Bethesda试验为例，将用pH7.4的咪唑缓冲液稀释的不同稀释度(1:1、1:2、1:4等)的患者血浆与正常混合血浆(Nijmegen试验中用咪唑缓冲液处理过的正常混合血浆)等量混合，37℃孵育2h后，测定每份混合血浆的FVⅢ活性，用该值除以用咪唑缓冲液与正常混合血浆等量混合(Nijmegen试验中用无抑制物的乏FVⅢ血浆与正常混合血浆等量混合)于37℃孵育2h后的对照血浆的FVⅢ活性，便得到残留的FVⅢ活性的百分比，用该值通过抑制物滴度标准表可查得对应的抗体滴度。具体步骤见图2。如果在1~4周内连续两次用Bethesda法或者Nijmegen法检测发现患者抑制物滴度≥0.6BU/ml则为阳性。若患者输注凝血因子，在检测抑制物滴度前应有48h(FVⅢ)或72h(FIX)的洗脱期；若患者需要持续输注凝血因子，不能经历足够的洗脱期或者患者凝血因子活性5%,可利用免疫球蛋白的耐热性在进行滴度检测之前对患者血浆进行加热(58℃加热90min)以灭活血浆中残留的凝血因子，降

低因FVⅢI/FIX活性过高对检测结果造成的干扰。

NPP:正常混合血浆；滴度计算：选取最接近50%的剩余因子活性值，由抑

制物滴度标准表查得相对应的滴度数，该滴度数值乘以该样本的稀释倍数

即为最终抑制物滴度

3.抗磷脂抗体：

抗磷脂抗体也可引起APTT延长，且纠正试验不能纠正。虽然大部分凝血因子抑制物(尤其FVⅢ)表现为时间依赖性，但也有少部分(10