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食品中霉菌和酵母的快速检测
测试片法
1范围
本文件规定了霉菌和酵母（moldsandyeasts）的快速检测-测试片法。
本文件适用于食品及加工环境中霉菌和酵母的快速计数。含有较高活性酶或较深颜色色素的样品需
进行稀释处理以减少样品对测试片检测效果的干扰并验证执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB4789.15-2016食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数
3设备和材料
3.1电子天平：感量0.1g。
3.2拍击式均质器及均质袋。
3.3旋涡混合器。
3.4培养箱：28℃±1℃。
3.5灭菌锅。
3.6无菌锥形瓶（容量500mL）。
3.7pH计或精密pH试纸：精密度0.1。
3.8无菌吸管：1mL(0.01mL刻度)、10mL（0.1mL刻度）。
3.9无菌微量移液器及枪头：1mL。
3.10无菌试管：18mm×180mm。
®
3.11Smartcounter全自动菌落计数器。
3.12不锈钢多联过滤系统。
3.13单片无菌微生物分析滤膜无菌滤膜:47mm×0.45μm。
3.14不锈钢采样板/物表采样板:10cm×10cm。
4培养基和试剂
®
4.1HandyPlate快速霉菌酵母测试片。
4.2磷酸盐缓冲液：见附录A.1。
4.3无菌生理盐水：见附录A.2。
4.41mol/LNaOH：见附录A.3。
4.51mol/LHCL：见附录A.4。
®
4.6EHKHK-PBS一次性采样管。
1
5检验程序
霉菌酵母测试片法检验程序见图1。
液体样品固体、半固体和
（含菌量少）液体样品环境样品
0.45m
μ47mm
25mL或其它规定的体积抽滤，25g(mL)样品+225mL稀释液，均质一次性采样管擦拭表面
再用15mL稀释液冲洗
漩涡混合以充分释
10倍系列稀释
放微生物
测试片预润湿
选择2～3个适宜稀释度的
贴滤膜样品匀液
取1mL加入快速霉菌酵母测试片，
每个稀释度2个平行
28℃±1℃48h±2h
菌落计数
报告
图1霉菌酵母测试片法检验程序
6操作步骤
6.1样品的稀释
6.1.1固体、半固体和液体样品：取25g(mL)样品，加入含有225mL无菌稀释液（蒸馏水或生理盐
水或磷酸盐缓冲液），充分振摇，或用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1：10的样品匀液。
6.1.2取1mL1:10样品匀液注入含有9mL无菌稀释液的试管中，另换一支1mL无菌吸管反复吹吸，
或在旋涡振荡器上混匀，此液为1:100样品匀液。
6.1.3
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