机能实验学课件：半数致死量的测定.ppt

半数致死量的测定

半数致死量（LD50）：是药物、毒物及病原微生物等毒力水平的一个标志。它表示能使全部实验对象死亡半数的剂量或浓度。

是评价化学物质急性毒性大小最重要的参数，也是对不同化学物质进行急性毒性分级的基础标准。化学物质的急性毒性越大，其LD50的数值越小。

半数有效量（ED50）：能使群体中有半数个体可以出现某一疗效的剂量。

常与ED50配合计算治疗指数LD50/ED50，用以评价药物的安全性，治疗指数大的药物相对安全。

TI=LD50/ED50

实验目的

掌握半数致死量测定的基本方法和寇氏法的适用条件。

熟悉动物的常用分组方法。

了解寇氏法公式的推导过程。

实验条件

测定LD50的方法有很多，如寇氏法、目测机率单位法、直线回归法、累计法、序贯法以及Bliss法等。其中Bliss法为最经典、最准确的方法，但需要用计算机和相应软件来完成。

寇氏法（Kärbar氏法）：寇氏法较常用，并有计算简便，结果较准确等特点。

寇氏法条件

1.剂量必须按等比级数（剂量对数按等差级数）分组。

2.各组动物数应相等。

3.“反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率（Pn）应为0％，最大剂量组的死亡率（Pm）应为100％；

如果Pn20%或Pm80%需用校正公式计算；

如果Pn20%或Pm80%则不能用此法计算。

实验动物

小白鼠

实验药品

不同浓度敌百虫、硝酸银

实验器材

鼠笼、动物天平、1ml注射器、电子计算器

实验步骤

１．预备实验

①摸索上下限

即用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最小剂量(Dm)和一个动物也不死亡的最大剂量(Dn)。观察2～3只动物的死亡情况。如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出Pm=100％和Pn=0％的剂量，此两量分别为上下限。

实验步骤

１．预备实验

②确定组数，组距及各组剂量

组数：一般5～8组，可根据适宜的组距确定组数，如先确定5组，若组距过大，可再增加组数以缩小组距。有时也可根据动物死亡情况来决定增减组数。

组距：指相邻两组剂量对数之差，常用“d”来表示。把上下限的剂量换算成对数值，设上限剂量的对数值为Xk，下限剂量的对数值为X1，组数为G则：

Xk-X1

d=────

G-1

实验步骤

１．预备实验

确定各组剂量：由X1逐次加逐d（或Xk逐次减d），得出各组剂量的对数值，再分别查反对数：即得出各组剂量（呈等比级数排列）。

实验步骤

２．正式实验

①实验动物的选择与分组

选择原则：可据不同实验而选取动物，应选择对被试因素敏感的动物。同时也应考虑动物来源，经济价值及操作简便等条件。LD50常用小白鼠进行实验来测得。

分组原则：每组动物数必须多于组数。因为每组动物数如少于组数，就不能充分反映各组死亡率的差别。

我们此次实验将动物分成7组，每组10只小鼠。

分组方法：按体重分群，再随机分组。（5g)

实验步骤

２．正式实验

②给药、观察死亡数、求出死亡率

给药途径：腹腔注射

0.5ml/20g

给药顺序：同时给药

观察时间：一小时

实验步骤

LD50计算表

组别

浓度

剂量

对数剂量

动物数

死亡数

死亡率

P(1-P)

(%)

(mg/kg)

Xi

n

r

P(r/n)

1

1.4

357

2.553

10

2

1.7

420

2.623

10

3

2.0

493

2.693

10

4

2.3

579

2.763

10

5

2.7

681

2.833

10

6

3.2

800

2.903

10

7

3.8

940

2.973

10

∑

实验步骤

①基本公式

LogLD50=Xk-D(ΣP-0.5)