肝素钠有关物质检测方法学研究及效价的快速测定.pdfVIP

浙江大学硕士学位论文摘要

摘要

肝素钠(Heparinsodium)是一种硫酸氨基葡聚糖的钠盐，具有抗凝血作用，是

需要迅速达到抗凝作用的首选药物，被广泛用于治疗静脉血栓和预防凝血。2008

年爆发的“肝素钠事件”暴露出肝素钠的药品标准存在严重漏洞。经调查，大量

掺杂了多硫酸软骨素(Over-sulfatedchondroitinsulfate,OSCS)的肝素钠污染品是

造成病患出现了过敏反应和其他副作用的主要原因。由于多硫酸软骨素的结构、

电荷密度、分子量、抗凝活性均与肝素钠十分相似，如何快速和准确测定肝素钠

中的多硫酸软骨素和硫酸皮肤素(Dermatansulfate,DS)等杂质，是提高该药品检

测水平的关键，也是提高肝素钠用药安全性的关键。

因此本文首先对2008年以来各国药典及文献报道的肝素钠有关物质的检测

方法进行了比较系统的研究，建立了以新的阴离子交换HPLC检测方法，优化了

阴离子交换HPLC法的各种色谱条件，并对新方法进行了包括分离度、重复性和

耐用性等的方法学验证，确立了肝素钠中的OSCS和DS的检测限和定量限，应

用该方法对肝素钠相关产品进行检测，不仅可以准确测定肝素钠粗品、原料药和

制剂中的OSCS和DS,还可以准确测定低分子量肝素钠(LMWH)、依诺肝素钠

原料药和制剂中的OSCS,新方法切实可行，有望应用到新的药典标准中。

将新的弱阴离子交换HPLC法与毛细管电泳(CE)、核磁共振(NMR)这两种

OSCS的测定方法进行比较研究。从方法可靠性、简便性、经济可行性等指标分

别考察。提出了WAX-HPLC法是一种适合中小厂家规模的分析方法。

为了快速测定肝素钠在制备过程中的效价变化，还优化开发了天青A双波

长分光光度法。以天青A作为显色剂，以酶标仪代替分光光度计，达到快速测

定肝素钠效价目的的同时，也可以减少样品和试剂的用量。与羊血浆法测定结果

相差土4U/mg以内。

关键词：阴离子交换；肝素钠：多硫酸软骨素；硫酸皮肤素；HPLC；肝素钠效

价：天青A：双波长分光光度法

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浙江大学硬士学位论文摘要

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浙江大学硕士学位论文ABSTRACI

ABSTRACT

Heparinsodiu(HP)isthesodiusaltofsulfatedglycosaminoglycans.Heparin

isbestknownasanintravenousanticoagulantandwasintroducedintomedical

practiceinthe1930s,soitisoneoftheoldestdrugscurrentlyinwidespreadclinical

use.However,seriousadverseeventsassociatedwithheparinadministrationwere

reportedduring2007-2008.Thisadulterationmadethenewsandputheparinintothe

limelight.Asreported,over-sulfatedchondroitinsulfate(OSCS)incontaminated

heparinproductsisthesourceofpatientsreceivingheparinsodiuresultinginacute

allergicreactionsandevendeath.