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摘要
摘要
本研究以刺五加籽为原料,依据刺五加籽精油提取率为指标,对石油醚连续提取
法和超临界CO2萃取法提取刺五加籽精油进行比较,确定最佳提取方法为超临界CO2
-GC-MS
萃取法;采用气相色谱质谱联用法()对甲酯化后的刺五加籽精油进行脂肪
酸的检测分析;应用网络药理学对刺五加籽精油的活性成分进行分析;通过体外抗氧
化实验和细胞抗炎实验验证刺五加籽精油具有抗氧化和抗炎的功效。本论文主要的研
究结果如下:
1、采用石油醚连续提取法和超临界CO萃取法,对刺五加籽中的刺五加籽精油
2
进行提取,并且对这两种方法进行优化,石油醚连续提取法的刺五加籽精油提取率为
0.8%,超临界CO2萃取法的刺五加籽精油提取率4.01%,由此得到,最佳提取方法是
超临界CO萃取法。由单因素实验、正交实验和极差分析来明确最优提取条件:提
2
40℃25MPa180minCO10L/h
取温度,提取压力,提取时间,流量。
2
2-GC-MS
、通过气相色谱质谱联用法()对甲酯化后的刺五加籽精油的脂肪酸进
行检测,从刺五加籽精油中找到脂肪酸33种,饱和脂肪酸占39.54%,不饱和脂肪酸
60.46%1%11-
占,含量大于的的脂肪酸有十六烷酸、亚麻酸、油酸、亚油酸、二十
109
碳烯酸、二十烷酸、-十九碳烯酸、硬脂酸、-十六碳烯酸、肉豆蔻酸。
3、以网络药理学为基础对刺五加籽精油中含量大于1%的10种脂肪酸进行分析,
NISTPubchemSwissTargetPrediction
使用、、等系统,获得脂肪酸的对应靶点;通过
ClueGOMetascapeGOKEGG
插件和数据库对关键靶点的基因进行分析和分析;通
过Cytoscape软件构建刺五加籽精油“化合物-靶点”的网络图,发现其可能在抗氧
化和抗炎方面具有一定的作用。
4、通过抗氧化活性实验,结果为:刺五加籽精油清除DPPH自由基的半抑制浓
度为0.894mg/mL;刺五加籽精油清除羟基自由基的半抑制浓度为1.395mg/mL;刺
五加籽精油清除超氧阴离子自由基的半抑制浓度为1.685mg/mL。因此刺五加籽精油
具有体外抗氧化活性。
5、通过以下抗炎实验,刺五加籽精油对RAW264.7巨噬细胞、NIH3T3细胞做
MTTPGENOIL-2IFN-
实验、2分泌量、生成量、和γ分泌量,结果为:浓度在小于
等于6.0μg/mL的刺五加籽精油有助于两种细胞的生长;刺五加籽精油浓度在6.0
μg/mL时,对两种细胞PGE分泌量与倍他米松阳性药物相当;刺五加籽精油对两种
2
NO4.0μg/mL
细胞的生成量比脂多糖组低,刺五加籽精油浓度大于时,与倍他米松
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