Biacore 8K 基础培训资料.pdf

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Biacore™8K基础培训

Chapter1

表面等离子共振(SPR)技术与Biacore原理

课程目标

TM

•Biacore技术原理

‒表面等离子共振(SurfacePlasmonResonance,SPR)

‒传感图Sensorgram

TM

‒Biacore提供的分子相互作用信息

TM

•Biacore设备核心组件

‒SPR检测器

‒微流控系统(IFC)

‒传感芯片SensorChip

TM

•Biacore分析基本流程

‒偶联Immobilization

‒进样SampleInjectionBiacoreTM8k

‒再生Regeneration

•Biacore在基础科研中的应用

Cytiva3

BIAcore技术原理

BiomoleculeInteractionAnalysiscoretechnique

Cytiva4

Biacore

Ka:结合速率常数

•基于表面等离子共振原理(SPR)Kd:解离速率常数

KD(亲和力)=Kd/Ka

•高分辨率、高灵敏度、高质量数据

•无需添加任何标签

•实时检测(Real-time)

•全面的互作信息

Cytiva5

表面等离子共振原理(SPR)

反射光能量检测器

入射光源能量

角度

SPR角度

棱镜

50nm金膜时间

样品

微流路液相系统

•全内反射的条件下,入射光造成薄金层等离子体发生共振,导致反射光在某一特定角度(SPR角)能量低至几乎为

零;

•SPR角对金膜溶液测100-200nm范围内的折光率变化非常灵敏;

•分子间可逆的结合/解离造成金膜附近折光率的实时变化,这一现象被Biacore实时记录。

•Biacore类似一个高精度的光学天平,通过SPR原理放大信号,能检测芯片表面1pg/mm2的物质变化。

Cytiva

Biacore提供的生物分子相互作用信息

结合解离传感图

•有无结合(YesorNo)

•结合的特异性和选择性(Specificity)

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