电镜技术问题的发现及研究PPT课件.ppt

The1970NobelPrizeinPhysiologyorMedicineB.KatzOnthequantalmechanismofneuraltransmitterreleaseNobelLectureDecember12,1970选择课题的原因Sherrington等观点的影响与Hodgkin等合作后研究的发展B.Katz认为神经肌肉接头与一般突触传递机理具有共性研究背景理论背景1.神经元学说2.动作电位的研究技术背景1.微电极技术2.示波器技术3.电镜技术问题的发现及研究发现扫描图上有0.4mv的小偏转终板电位（EPP）终板电位（EPP）的特点急剧上升缓慢下降，持续时间20ms.终板电流由Na，K同时跨膜流动引起.一种局部去极化.微电极研究Ach微电极电泳(Ach带正电,正脉冲电泳)1.电泳量连续变化(人工的电位变化)(1)间隙中(2)肌细胞中2.与mEPP比较分析试验,提出假说Ach电位连续平滑的降低说明了分子碰撞的电效应噪声水平低,像mEPP这样的离散性电位变化不可能用一个或少数几个Ach分子从神经末梢随机逸出来解释.必须是含有大量分子的一小包Ach同步轰击的结果,即thequantalmechanismofneuraltransmitterrelease这一小包Ach从哪里来的突触前细胞,突触间隙,突触后细胞Ach微电泳.时间分析电镜图片结论:Ach来自突触前神经末梢验证(1)切断神经,神经末梢溃变,mEPP消失(2)改变运动神经末梢的膜电位则能改变mEPP的发放水平.估算小包中的Ach量微电泳Ach模拟自然mEPP估算小包中的Ach量105电镜图片估算小包中的Ach量103～104试图更精确估算小包中的Ach量Ach的释放机制----电控分泌改变膜电位,膜电流mEPP的发放频率升高与神经冲动类比对EPP的进一步研究发现改变外Ca＋浓度↓或Mg＋浓度↓使EPP下降,开始连续下降,后不连续.对Ca的作用进一步研究Ach小包的释放与动作电位，Na与TTX，K与TEA(四乙胺)人为去极化,EPP出现去Ca则EPP不出现,去极化中微电泳Ca则EPP出现,去极化后微电泳Ca则EPP无.去Ca短期则EPP不出现,mEPP有.长期则EPP不出现,mEPP亦无记录到真正的”突触迟延”钙离子门设想机制的推广Ach既有小包释放又有分子扩散EPP与EPSPCa的作用用一定量的箭毒处理EPP与肌动作电位分开1.波形与EPP相似2.引发与EPP机制相似3.幅度小0.4mv,自发,随机,不连续,全或无.小终板电位（mEPP）的特点Electricalcontrolofthefrequencyofmin.e.p.p.‘s(cf.ref.14).Ineachpairoftraces,theuppershowsminiaturepotentials,thelowerindicatescurrentflowingthroughtheterminalpartofthemotoraxon.Thecathodewasplacednearthejunctionsoastodepolarizethenerveendings.Thiscausedthefrequencyofthedischargetoincreasedramatically.0.40.81.21.62.02.42.80.4mv**TheNobelPrizeinPhysiologyorMedicine1970fortheirdiscoveriesconcerningthehumoraltransmittorsinthenerveterminalsandthemechanismfortheirstorage,releaseandinactivationSirBernardKatz1911---2003?GodfreyArgent,fortheRoyalSociety,1952?BernardKatz’sschool,theK?nigAlbertGymnasium,Leipzig,in1912(left),andtoday?MartinGildemeiste