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白细胞计数ppt课件1--Neubauer(牛鲍)板计数法长治市第二人民医院检验科:薛彬彬
ppt课件2
1、目的:掌握显微镜法白细胞计数的原理 及方法。2、原理:用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。ppt课件3
3、器材:显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。4、试剂:白细胞稀释液:2%冰乙酸2ml,10g/L结晶紫(或亚甲蓝)3滴,加蒸馏水到100ml。5、标本:新鲜 全血或末梢血。ppt课件4
改良的牛鲍计数板。ppt课件5
ppt课件6
操作步骤1、加稀释液:用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2、吸取血液:用微量吸管吸取新鲜全血或ppt课件7?????末梢血20ul,擦去管尖外部余血。将吸管插入试管中白细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次。
3、混匀:将试管中血液与稀释液混匀,待细胞悬液完全变为棕褐色。4、充池:再次将小试管中的细胞悬液混ppt课件8????匀,用微量吸管吸取7ul左右充入改良牛鲍计数板的计数池中,室温静置2-3分钟,待白细胞完全下沉。
5、计数:在低倍镜下计数四角4个大方格的白细胞总数。6、计算:WBC=N/4×10×20×106=N/20×109其中N为4个大方格的白细胞总数。ppt课件9
7、细胞计数原则大方格四边压线细胞数左不数右,数上不数下,弓形移动ppt课件10
8、考核评价a. 常规考核标准 (RCS)RCS=×100%评价:白细胞≤4.0×109/L者,白细胞在(4.1-14.9)×109/L者白细胞≥15.0×109/L者超过上述标准者为不合格RCS<30%RCS<20%RCS<15%b. 其他方法四大格所见白细胞最大值—最小值ppt课件11四大格所见白细胞数平均值
注意事项稀释液密封保存,防止污染,小试管、计数板、盖片均须清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。采血时针刺深度必须适当,不能过度挤压,防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。稀释液和采血量要准确,充分混匀,充液适量,无不足、外溢和气泡,细胞分布均匀。ppt课件12
白细胞总数在参考范围内,大方格间的细胞数不得相差10个以上,两次重复计数误差不得超过10%。白细胞数量过高时,可加大稀释倍数,白细胞数量过低时,可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。ppt课件13
(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多,会计数在白细胞总数内,应校正。校正公式:白细胞校正数/L=M×(100/100+N)M为未校正前白细胞数,N为在白细胞分类时,计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。ppt课件14
谢谢大家!ppt课件15
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