基质辅助激光解吸.pptx

基质辅助激光解吸

质谱离子化技术

04基质的选择

02背景

目录

技术原理

简介

01

03

05技术特点

06应用

目录

07总结

基本信息

基质辅助激光解吸离子化技术(Matrix-assistedlaserdesorption/ionization,MALDI)是一种新的

质谱离子化技术。MALDI由激光解吸(LD)发展而来，解决激光解吸难挥发和热不稳定高分子样品的离子化问题。

简介

化的技术，可以得到用常规离子化方法容易解离而得到分子碎片的一些大分子的质谱信息，比如生物分子类的

DNA,生物高分子、蛋白质、多肽和糖,以及其他大分子量的有机分子，如高分子、树状分子和其他大分子，在

这方面类似于同样是软离子化方法的电喷雾离子法，不过MALDI更容易得单电荷的离子峰。

简介

基质辅助激光解吸(Matrix-assistedlaserdesorption/ionization,MALDI)是一种用于质谱的软的离子

背景

背景

近年来，激光解吸离子化质谱(LDI-MS)已成为分析非挥发性有机物的重要方法之一，LDI作为傅里叶变换

离子回旋共振质谱(Fourier-transformioncyclotronresonance,FT-ICR)和飞行时间质谱(timeof

flight,TOF)的离子化方法，已成功地用于对无机物、合成聚合物以及低分子量生物分子的分析，得到了令人满

意的结果。然而用激光解吸测定的有机物其分子质量均低于2.98ku。有实验表明，分子离子的软解吸仅来源于能较好吸收激光的分子，对于在激光波长处没有吸收的样品，不能被共振激发，离子的产生就需要较高的辐射度，

这样就不可避免地破坏了有机分子，限制了LDI对分子量高于2.98ku的热不稳定性大分子的测定。

1988年，德国科学家KARAS和HILLENKAMP等首次提出基质辅助激光解吸离子化(Matrix-assisted

laserdesorption/ionization,MALDI)技术。MALDI可用于测定分子量为102～106Da的生物分子，目

前已被广泛地用于测量多肽、蛋白质、核酸等生物大分子的分子量以及高分子聚合物的分子量分布。MALDI质谱技术具有灵敏度高、适用范围广、操作简单等特点，使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术拓展到分析高极性、难挥发和热不稳定样品的范围。

技术原理

技术原理

MALDI原理和图例对于热敏感的化合物，如果进行极快速的加热，可以避免其受热分解。MALDI技术与此原理相似：即在一个微小的区域内，在极短的时间间隔(ns数量级)中，激光对靶上待分析物质提供高强度脉冲式能量，使其在瞬间完成解吸和电离，且不产生热分解。MALDI是一种直接气化并离子化非挥发性样品的质谱离子化方式，但是其离子化机理尚不清楚，存在两种可能性：离子在固态时已形成，激光照射时只是简单的释出；或是由激光引发的离子-分子反应产生的。

MALDI的解吸离子化过程与基质的种类、激发光波长和激光照射强度有关。

基质的选择

基质的选择

采用固体基质分散待测样品是MALDI技术的主要特色。基质是和待测样品共存、吸收入射激光以防止其直接

照射致使待测样品被破坏的物质。将待测样品以高稀释比例(基质:样品=:1)分散在基质中，基质有效地吸收一定波长的脉冲激光的能量后，均匀地传递给待测样品，使之瞬间气化并离子化。此外，大量的基质使待测样品有效分散，从而减少待测样品分子间的相互作用。

基质的选择是MALDI分析中最重要的步骤之一，理想的基质一般具有以下性质：在采用的激光波长处有较强

的电子吸收；有较好的真空稳定性，较低的蒸气压，以及在固态时和分析物有较好的混溶性。

在MALDI技术中，基质对样品的分析有特殊的作用：

①稀释样品，使簇合的大分子解离；

②保护样品，基质吸收激光能量后转移给样品，避免激光直接照射样品而引起样品分子分解;

③提供质子，通过质子转移等使样品分子离子化；

④提供卷流，抛出样品分子。基质的选择主要取决于所采用的激光波长，其次是被分析对象的性质。常用的基质有烟酸、2,5-二羟基苯甲酸和介子酸。多数MALDI都是采用固体(结晶性)的有机基质，,但这些基质在低质量区会产生相应的背景峰，从而干扰小分子化合物的定性。

技术特点

技术特点

与电子轰击电离、化学电离等其它