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消化道肿瘤多药耐药基因的表达与临床相关性的研究

摘要目的：为了研究消化道肿瘤多药耐药基因及其产物表达对化疗效果的

影响。方法：应用免疫组化SP法检测106份消化道肿瘤组织中pgp、GST-π和

TopoⅡ表达并分析其与消化道肿瘤临床病理特征的关系。结果：消化道肿瘤组织

中pgp、GST-π和TopoⅡ阳性率分别为63.1%、62.5%和52%，与性别、肿瘤大

小、部位、临床分期及浸润深度无明显关系(P＜0.05)；高、中分化腺癌pgp

阳性率明显高于低分化腺癌(P＜0.05)；GST-π和TopoⅡ表达与肿瘤淋巴结

转移有关(P＜0.05)；印戒细胞癌TopoⅡ阳性率明显低于其他组织学类型

(P＜0.05)。结论：pgp、GST-π及TopoⅡ在消化道肿瘤MDR发生中起重要

作用，同时检测BCL-2基因在消化道肿瘤中的表达及其与MDR的消长变化，四

者联合检测对化疗方案的制定及药物的选择意义重大，为开展个体化治疗提供依

据。

关键词消化道肿瘤多药耐药基因产物检测个体化治疗

目前化疗是恶性肿瘤治疗中除手术、放疗以外最重要的手段，然而许多肿瘤

常规化疗效果差，甚至失败。近年来研究表明肿瘤多药耐药（MDR）已成为肿

瘤成功化疗的重要障碍之一。因此，克服MDR就成为肿瘤成功化疗的当务之急。

选取消化道肿瘤患者106例，探讨MDR基因产物pgp、GST-π、TopoⅡ在消化

道肿瘤MDR发生中的作用，为消化道肿瘤化疗药物的选择提供依据。

资料与方法

2006年3月～2010年12月收治消化道肿瘤患者106例，经病理学检查证实。

病理类型：胃腺癌47例，胃印戒细胞癌11例，直结肠腺癌33例，食管腺癌15

例。

组织标本的采集及贮存：全部标本均在手术切取肿瘤时收取，取材时避免取

到肿瘤中心的坏死组织，106例消化道恶性肿瘤患者手术切除标本，经10%的福

尔马林固定液固定，经脱水、包埋、切片进行免疫组织化学染色，试剂选自福州

迈新公司。所选试剂有多药耐药化学基因糖蛋白-PgP，拓扑异构酶Ⅱ-Topo-Ⅱ，

谷胱甘肽S转移酶-GST-π，Bcl-2。

意义：①多药耐药化学基因糖蛋白-PgP，意义：阳性(++)以上，耐药药物有

阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托霉素、长春花碱、长春新碱、Vp-16、紫杉

醇、泰素帝。②拓扑异构酶Ⅱ-Topo-Ⅱ，意义：阴性/1级，耐药药物有阿霉素、

柔红霉素、表阿霉素、Vp-16、vm26、玫瑰树碱。③谷胱甘肽S转移酶-GST-π，

意义：阳性（++）以上，耐药药物有阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。

④Bcl-2，意义：是细胞凋亡的一种抑制因子，参与细胞凋亡的调控，亦可用于

各种恶性肿瘤细胞的凋亡研究。

研究方法：⑴组织切片标本的制备：①固定：10%的福尔马林固定液固定。

采用福尔马林固定液固定组织可保留绝大多数抗原，对免疫组织化学染色影响不

大。②取材：对手术切除标本常规取材，避免取到肿瘤中心的坏死组织。③为了

充分保存组织的抗原性，标本离体后立即采用固定剂脱水、浸蜡、包埋、制备成

石蜡切片。⑵免疫组织化学染色及显色。⑶判断分析染色结果：①耐药判断标准：

pgp、GST-π的判断标准以（+）表示，阳性细胞表达数＜10%阴性，10%～25%(+)，

25%～75%(++)，＞75%(+++)。Topo-Ⅱ的判断标准以级别表示，观察500个或

1000个肿瘤细胞，阳性细胞数/500或1000×100%来计算。阳性细胞数＜25%以

下Ⅰ级，25%～50%Ⅱ级，50%～75%Ⅲ级，＞75%Ⅳ级。②Bcl-2的判断标

准：阳性部位：胞膜或胞浆。

结果

消化道肿瘤组织中pgp、GST-π和TopoⅡ阳性率分别为63.1%、62.5%和52%，

pgp与性别、肿瘤大小、部位、临床分期及浸润深度无明显关系(P＜0.05)；

高、中分化腺癌pgp阳性率明显高于低分化腺癌(P＜0.05)；GST-π和Topo