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汇报人：AA

2024-01-31

动物细胞培养

目录

动物细胞培养基本概念与原理

动物细胞类型与特点分析

动物细胞培养基选择与优化策略

动物细胞传代、冻存和复苏技术操作指南

动物细胞污染预防与处理措施

动物细胞培养在生物医学领域应用前景

01

动物细胞培养基本概念与原理

Part

动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖的过程。

定义

动物细胞培养技术始于上世纪初，经历了原代培养、传代培养、细胞系建立等重要阶段，现已广泛应用于生物学、医学等多个领域。

发展历程

动物细胞培养基于细胞增殖和分化的原理，通过提供适宜的生长环境和营养物质，促进细胞生长、分裂和分化。

原理

动物细胞培养主要包括原代培养、传代培养、细胞冻存与复苏等方法。其中，原代培养是从机体直接获取组织进行培养；传代培养是将细胞不断分裂并移植到新的培养基中；细胞冻存与复苏则是将细胞保存在超低温环境中，以便长期保存和后续实验使用。

方法简介

常用设备

动物细胞培养实验室常用设备包括生物安全柜、超净工作台、离心机、培养箱、显微镜等。

技术

实验室常用技术包括无菌操作技术、细胞传代技术、细胞计数与活力检测技术、细胞冻存与复苏技术等。这些技术是进行动物细胞培养实验的基础和关键。

动物细胞培养需要适宜的温度、湿度、pH值、渗透压等条件，同时还需要提供足够的营养物质和生长因子。

影响动物细胞培养的因素包括细胞密度、培养基成分、培养时间、温度波动等。这些因素会直接影响细胞的生长状态和实验结果。

影响因素

培养条件

02

动物细胞类型与特点分析

Part

原代细胞

直接从动物体内获取的细胞，经过初步处理后用于培养，能够较好地反映体内细胞的状态和特性。

传代细胞

由原代细胞经过多次传代培养得到的细胞，具有稳定的生长特性和功能特点，但可能因传代过程中的变异而与原代细胞存在差异。

1

2

3

来源于早期胚胎的内细胞团，具有自我更新和多向分化潜能，可分化为各种组织和器官。

胚胎干细胞

存在于已分化组织中的干细胞，具有有限的自我更新和分化能力，可维持组织稳态和修复损伤。

成体干细胞

通过基因重编程技术将体细胞转化为具有类似胚胎干细胞特性的细胞，具有广泛的应用前景。

诱导多能干细胞（iPS细胞）

具有无限增殖、侵袭转移、抗凋亡等特性，是癌症发生和发展的基础。

肿瘤细胞特性

包括细胞形态学观察、细胞增殖与凋亡检测、细胞侵袭与迁移实验、基因表达与调控研究等。

研究方法

神经细胞

具有高度的特异性和复杂的网络结构，是神经系统的基本单位。

生殖细胞

包括精子和卵子等，具有遗传信息传递和生殖繁衍等功能。

心肌细胞

具有自律性、兴奋性和传导性等特点，是心脏收缩和舒张的基础。

免疫细胞

包括T细胞、B细胞、巨噬细胞等，具有识别、杀伤和清除病原体等功能，是机体免疫应答的重要组成部分。

03

动物细胞培养基选择与优化策略

Part

天然培养基通常由动物或植物组织提取液、生物体液（如血清）等组成，含有丰富的生长因子、激素、附着因子等。

天然培养基主要成分

天然培养基中的成分能够模拟体内环境，为细胞提供必要的营养和生长因子，促进细胞贴壁、增殖和分化。

作用机制

设计原则

合成培养基根据细胞生长需求和代谢特点进行设计，通过添加必需的营养成分、生长因子和调节因子等，满足细胞体外培养的需求。

优势

合成培养基成分明确、可重复性好，便于进行质量控制和批量化生产。同时，可以减少外源性污染和免疫反应的风险。

VS

无血清培养基是指不含动物血清成分，但能够满足细胞生长和增殖需求的培养基。

应用前景

随着细胞治疗、再生医学等领域的快速发展，无血清培养基在细胞体外扩增、分化诱导等方面具有广阔的应用前景。同时，无血清培养基还有助于提高细胞产品的安全性和质量。

无血清培养基的定义

需求分析

根据细胞类型、培养目标和应用场景等需求，确定培养基的关键性能指标和配方组成。

规模化生产与质量控制

建立稳定的生产工艺和质量控制体系，确保定制化培养基的批量化生产和质量稳定性。

配方设计

基于需求分析结果，进行培养基配方设计，包括选择适当的营养成分、生长因子和调节因子等。

优化与验证

通过细胞实验和代谢组学等方法，对培养基配方进行优化和验证，确保培养基能够满足细胞生长和增殖的需求。

04

动物细胞传代、冻存和复苏技术操作指南

Part

操作步骤

消化细胞，离心收集，重悬分盘，显微镜下观察细胞密度和状态。

注意事项

避免过度消化导致细胞损伤，保持无菌操作以防污染，控制细胞密度以保证生长空间。

保护剂种类

DMSO（二甲基亚砜）、甘油等。

使用方法

按照一定比例将保护剂与细胞悬液混合，程序降温后放入液氮长期保存。

注意事项

保护剂浓度和降温速率需严格控制，以减少对细胞的损伤。

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