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鉴别肠道细菌的V.P.试验鉴别原理缩合脱羧2丙酮酸乙酰乳酸乙酰甲基甲醇碱性条件2,3-丁二醇二乙酰〔与培养基中精氨酸的胍基结合〕红色化合物-CO2第六章微生物的代谢鉴别肠道细菌的产酸产气
甲基红〔M.R〕试验产酸产气试验:Escherichia与Shigella在利用葡萄糖进行发酵时,前者具有甲酸氢解酶,可在产酸的同时产气,后者那么因无此酶,不具有产气的能力。甲基红试验:大肠杆菌与产气气杆菌在利用葡萄糖进行发酵时,前者可产生大量的混合酸,后者那么产生大量的中性化合物丁二醇,因此在发酵液中参加甲基红试剂时,前者呈红色,后者呈黄色。大肠杆菌:产酸较多,使pH﹤4.5产气杆菌:pH﹥4.5第六章微生物的代谢IMViC试验=吲哚〔I〕、甲基红〔M〕、V.P.试验〔Vi〕柠檬酸盐利用〔C〕共四项试验。用以将大肠杆菌与其形状十分相近的肠杆菌属的细菌鉴别开来。吲哚试验甲基红试验V—P试验柠檬酸盐利用大肠杆菌++--产气杆菌--++第六章微生物的代谢概念:是以分子氧作为最终电子(或氢)受体的氧化过程;是最普遍、最重要的生物氧化方式。途径:EMP,TCA循环特点:必须指出,在有氧呼吸作用中,底物的氧化作用不与氧的复原作用直接偶联,而是底物在氧化过程中释放的电子先通过电子传递链〔由各种电子传递体,如NAD,FAD,辅酶Q和各种细胞色素组成〕最后才传递到氧。2、有氧呼吸★★★由此可见,TCA循环与电子传递是有氧呼吸中两个主要的产能环节。Figure.Aerobicrespiration电子传递与氧化呼吸链定义:由一系列氧化复原势不同的氢传递体组成的一组链状传递顺序。在氢或电子的传递过程中,通过与氧化磷酸化反响发生偶联,就可产生ATP形式的能量。部位:原核生物发生在细胞膜上,真核生物发生在线粒体内膜上成员:电子传递是从NAD到O2,电子传递链中的电子传递体主要包括FMN、CoQ、细胞色素b、c1、c、a、a3和一些铁硫旦白。这些电子传递体传递电子的顺序,按照它们的氧化复原电势大小排列,电子传递次序如下:MH2→→→NAD FMN C0Q b(-0.32v) (0.0v) C1 C a a3 O2 H2O(+0.26)(+0.28)(+0.82v)呼吸链中NAD+/NADH的E0’值最小,而O2/H2O的E0’值最大,所以,电子的传递方向是:NADHO2上式说明复原型辅酶的氧化,氧的消耗,水的生成。NADH+H+和FADH2的氧化,都有大量的自由能释放。证明它们均带电子对,都具有高的转移势能,它推动电子从复原型辅酶顺坡而下,直至转移到分子氧。电子传递伴随ADP磷酸化成ATP全过程,故又称为氧化呼吸链。呼吸链的功能:一是传递电子;二是将电子传递过程中释放的能量合成ATP——这就是电子产地磷酸化作用〔或称氧化磷酸化作用〕。典型的呼吸链自EMP2NADH2自乙酰CoA2NADH2自TCA6NADH2自TCA2FADH2高能水平低氧化还原势氧化态 还原态还原态 氧化态 氧化态 还原态还原态 醌 氧化态氧化态 还原态 脱氢酶NAD FADH2 H2ONADH2 FAD 1/2O2 +2H+低能水平高氧化还原势FP Fe-S Cyt.b Cyt.c Cyt.a Cyt.a3 氧化酶典型的呼吸链原核生物呼吸链的特点存在于细胞膜上呼吸链中的氧还载体取代性强,如CoQ可被MK取代呼吸链中的氧还载体的数量在不同的种间,不同的环境条件下可增可减有分支呼吸链的存在,表现在来自不同的底物的复原力进入呼吸链时有不同的分支,不同的微生物细胞色素系统有别,如E.Coli在缺氧时,呼吸链分为两支,即Cyt.b556Cyt.o;Cy
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