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白细胞计数标准操作程序

1方法

目视显微镜计数法。

2原理

血液经白细胞稀释液稀释后，成熟红细胞全部被溶解，充入计数池后，在显微镜下计数一定体

积内白细胞数，换算出每升血液中白细胞数量。

3试剂

3.1白细胞稀释液（自配）：

3.1.1成份：

冰醋酸2ml

蒸馏水98ml

10g/L亚甲蓝溶液3滴

3.2试剂制备：将2ml冰醋酸和98ml蒸馏水混合，滴加3滴10g/L的亚甲蓝溶液，混匀过滤后备用。

3.3储存条件：室温保存。

3.4使用期限：1年。

4实验器材

显微镜、滴管、改良牛鲍氏计数池、移液管、吸耳球、6mm×70mm玻璃试管、乳胶手套、移液

器等。

5标本要求

5.1取混匀静脉血标本20l，充入含血小板稀释液0.38ml的小试管内，混匀。在小试管外用记号

笔标明编号。

5.2采血后室温条件下，立即送检。

5.3标本在室温下最多保留4小时。不能在4小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（2℃-8℃）中保

存，8小时内标本有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。

6操作步骤

6.1取小试管1支，加入白细胞稀释液0.38ml，在小试管外标上明确标示（姓名、编号、日期）。

6.2用移液器准确吸取末梢血20l，擦去管尖外部余血，插入小试管中稀释液的底部，轻轻将血放

出，最后用手摇动试管混和。

6.3充池（做2份），静置2-3分钟，待白细胞下沉。

9

6.4用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数。（WBC1×10时，计数9个大方格内白细胞数，然

后经一定计算转换。）

9

6.5计数时，在两次重复计数误差≤±10%或±0.5×10/L的前提下，取平均值，否则需重做，并

查找原因。

注：两次重复计数是指将同一标本充入已校准的两块不同的计数池内，分别进行手工计数，两次计

数误差WBC≤10%或PLT≤25%。

7计算

4个大方格内白细胞总数

6

白细胞数/L=102010/L

4

6

=4个大方格内白细胞总数5010/L

式中：

4：为每个大方格（即0.1l）内白细胞平均数；

10：1个大方格容积为0.1l，换算成1l；

20：血液稀释倍数；

6

10：由1l换算成1L。

例：低倍镜下计数4角4个大方格内的白细胞数分别为：40，43，37，40，

40+43+37+40

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则白细胞数/L=102010/L=8.010/L

4

8参考范围

9

成人（4-10）×10/L

9临床意义

9.1增加：

9.1.1生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼

痛等。

9.1.2病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传

染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。

9.2减少：病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭

照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。

10注意事项

10.1大小方格内压线的细胞应按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。

10.2稀释液要过滤，小试管、计数板均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。

10.3每周做一次稀释液空白计数，若发现混有杂质、微粒，在排除计数板、滴管污染的情况下，过