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未知驱动探索，专注成就专业
临床分子生物学检验技术实验指导
简介
临床分子生物学检验技术是一种在临床医学中应用的分子
生物学技术，通过分析和检测个体的基因组、蛋白质组和代谢
产物等分子级别的信息，以帮助诊断和治疗疾病。本文档将指
导您进行一系列临床分子生物学检验技术实验，包括基因扩增、
基因测序和蛋白质分析等。
基因扩增实验
实验材料
•反应体系：DNA模板、引物、dNTPs、酶切酶、
Taq聚合酶、缓冲液等
•实验仪器：热循环仪、电泳仪等
•实验耗材：离心管、PCR管、琼脂糖凝胶、电泳试
剂等
实验步骤
1.准备反应体系：
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–将PCR管中添加所需的反应体系成分，包括
DNA模板、引物、dNTPs、酶切酶、Taq聚合酶和缓
冲液等，按照所需体积进行计量。
–将PCR管密封。
2.设置热循环仪参数：
–根据扩增反应的需求，设置热循环仪的参数，
如退火温度、延伸温度和循环次数等。
3.进行扩增反应：
–将PCR管放入热循环仪中，开始扩增反应。
4.等待扩增反应结束：
–根据所设定的循环次数，等待扩增反应结束。
5.进行电泳分析：
–取出PCR管中的反应体系，加入加载缓冲液，
并将其倒入琼脂糖凝胶槽中。
–以合适的电压和时间进行电泳分析。
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6.结果分析：
–通过电泳图，观察扩增产物带的大小和强度，
判断扩增是否成功。
基因测序实验
实验材料
•反应体系：DNA样本、引物、dNTPs、酶切酶、
DNA聚合酶、缓冲液等
•实验仪器：测序仪
•实验耗材：离心管、测序管等
实验步骤
1.提取DNA样本：
–从待测样本中提取DNA，使用适当的提取试剂
盒进行提取。
2.准备反应体系：
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–将测序反应所需的反应体系成分，包括DNA
样本、引物、dNTPs、酶切酶、DNA聚合酶和缓冲液
等，按照所需体积进行计量。
–将反应体系混合均匀。
3.进行测序反应：
–将反应体系转移到测序管中，加入测序仪所需
的荧光探针。
–将测序管放入测序仪中，开始测序反应。
4.等待测序反应结束：
–根据所设定的反应时间，等待测序反应结束。
5.结果分析：
–通过测序仪输出的测序图谱，解读每个碱基的
荧光信号，得到待测DNA序列。
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蛋白质分析实验
实验材料
•反应体系：蛋白质样本、抗体、色素底物、缓冲液
等
•实验仪器：SDS电泳仪、Westernblot仪等
•实验耗材：离心管、电泳胶等
实验步骤
1.准备样品：
–提取待分析的蛋白质样本，使用适当的提取试
剂盒进行提取。
2.准备样品加载缓冲液：
–根据所需加载样品的体积，将样品加载缓冲液
配制好。
3.准备电泳胶：
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–准备合适浓度的聚丙烯酰胺凝胶，并将其浇铸
到电泳槽中。
4.进行电泳分离：
–将样品与加载缓冲液混合，加载到电泳槽中。
–以适当的电压和时间进行电泳分离。
5.准备Wester
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