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动物细胞工程常用的技术手段
提问:
v植物细胞工程常用的技术手段有哪些
?
植物组织培养,植物体细胞杂交
动物细胞工程常用的技术手段:
动物细胞培养、动物细胞核移植、
动物细胞融合、单克隆抗体
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养和核移植技术
•动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,
将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养
中,让这些细胞生长和增殖。
1、选材:
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,
它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化
程度低,容易培养。
动物细胞工程常用的技术手段
2.分散成单个细胞
v在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散
细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动
物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下
胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-
8.4)的活性较高。
动物细胞工程常用的技术手段
3.动物细胞生长特性:
•细胞贴壁:
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,
称为细胞贴壁。
要求:
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞的接触抑制:
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞
就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑
制。
动物细胞工程常用的技术手段
4.过程:
动物细胞工程常用的技术手段
5.如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系
?
随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖
细胞株细胞系遗传物质改变
细胞
悬浮10代50代无限传
液细胞细胞代
传代培养
原代培养
多数组织细胞固定在表面
生长和分裂。
动物细胞工程常用的技术手段
加培养液
动物胚胎或幼龄动胰蛋白酶单个细胞细胞
物的组织、器官剪碎制成悬浮
去掉组织液
细胞增值
间蛋白
无限传代
细胞系细胞株
动物细胞培养不能
最终培养成生物体
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养条件:
1、无菌、无毒的环境
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)
3、温度和PH
保证细胞顺利的
36.5+(-)0.5度,7.2-7.4生长增殖
4、气体环境:
O和CO
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