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YOURLOGO;1.简述动物细胞的培养过程、条件及其应用;
2.简述克隆动物的概念含义和基本原理
3.简述体细胞核移植技术和动物克隆技术,以及应用前景
4.简述细胞融合的方法过程和单克隆抗体的制备过程应用;考点要求;动物细胞培养;;原理和方法;1.动物细胞培养的条件;③使用胰蛋白酶分散细胞说明细胞间的物质主要是。用胰蛋白酶处理(会/不会)把所培养的细胞消化掉?原因是;故必须控制好胰蛋白酶的。;⑤细胞贴壁和接触抑制
A.细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象;接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖的现象。
B.细胞贴壁生长对培养瓶的要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
C.打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。;⑥原代培养和传代培养辨析:
A.含义不同:
?动物组织消化后的初次培养称为。
?当贴壁细胞分裂生长到贴满瓶壁时用胰蛋白酶等处理,分瓶继续培养的过程称为。
B.细胞增殖特点不同:
?原代培养:细胞分裂旺盛。
?传代培养:正常细胞的传代培养的次数一般是有限的,一般传至10代后就不易传下去,一般来说细胞在传至10-50代左右,增殖会逐渐缓慢,甚至停止。但有些细胞会克服细胞寿命的自然极限,获得。目前使用的(如用于核移植的供体细胞)或冷冻保存的正常细胞通常选用传代代以内的细胞,这样做的目的是。;项目;项目;4.干细胞培养及其应用;4.干细胞培养及其应用;①胚胎干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题?其应用有什么限制因素?;③科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞,尝试说出几种获取iPS细胞的方法。;关于动物细胞培养的4点提醒;1.重组新冠病毒疫苗是将新冠病毒S蛋白受体结合区(RBD)基因通过基因工程技术,重组到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞内,在体外培养并大量表达出RBD二聚体的方法。下列说法正确的是()
A.CHO细胞作为新冠病毒的宿???细胞,提供病毒所需的营养物质
B.在体外条件下大规模培养重组CHO细胞,需要用液体培养基
C.体外培养重组CHO细胞时需添加适量的干扰素防止杂菌污染
D.CHO细胞能够表达出RBD二聚体,说明新冠病毒与仓鼠的遗传物质相同
答案:B;解析:CHO细胞不是新冠病毒的宿主细胞,中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是基因工程的受体细胞,A项错误;在体外条件下大规模培养重组CHO细胞,需要用液体培养基,因为液体培养液有利于被培养的细胞获取营养物质,B项正确;体外培养重组CHO细胞时需添加适量的抗生素,其目的是防止杂菌污染,C项错误;CHO细胞能够表达出RBD二聚体,说明新冠病毒与仓鼠应用的是同一套密码子,不能说明新冠病毒与仓鼠的遗传物质相同,D项错误。;动物细胞融合技术与单克隆抗体;1.动物细胞融合技术;;项目;项目;A.抗体的概念:抗体是机体受刺激后产生的、并能与之发生特异性结合的具有免疫功能的。
B.抗体是由细胞合成和分泌的,每种这种细胞能产生(一种/多种)抗体。
C.动物免疫反应中产生的抗体有(一/多)种
D.传统制备抗体的方法:向动物体内反复注射某种抗原,使之产生抗体,然后从动物中分离所需要的抗体;其缺点是:。
E.为获得单一的抗体,(能/不能)选用特定的浆细胞直接去培养;理由是。;①制备原理
A.B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞只分泌种特异性抗体。
B.骨髓瘤细胞特点:能在体外。
C.杂交瘤细胞的特点:既能,又能产生足够数量的。;②制备过程;C.单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的;项目;D.第一次筛选获得杂交瘤细胞的方法:
①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。
②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能分裂增殖。
③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。在培养基中加入氨基嘌呤,B淋巴细胞及同型融合细胞不能增殖,骨髓瘤细胞及同型融合细胞(氨基
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