早孕因子对红肉Neu5Gc诱导的CMAH-_-小鼠抗体产生的阻断研究.pdf

中文摘要

早孕因子对红肉Neu5Gc诱导的CMAH-/-小鼠抗体

产生的阻断研究

牛、羊和猪等哺乳动物的肉常被称之为红肉，是我们日常生活中必不可少

的动物源食品。饮食习惯的不同，使得红肉的摄入与人类各种病症相关联，比

如癌症、心血管疾病、II型糖尿病、高脂症和高血压等等。有大量资料证实，

长时间大量摄入红肉及其制品可能提高人体患有肿瘤和心血管疾病的危险。近

N-(N-

几年研究发现，红肉中存在一种潜在的致癌性物质—羟乙酰神经氨酸

glycolylneuraminicacid，Neu5Gc)，作为一种特殊的抗原物质，能够通过多种途

径修饰于人体细胞表面，激活免疫系统而产生抗体。这种抗体与抗原的持续作

用，引发慢性炎症反应，进一步导致肿瘤和癌症的发生与发展。由此可见，在

Neu5Gc诱发慢性炎症的过程中，抗体的产生是引发疾病的关键点，而抗体的产

生有赖于T细胞的辅助作用，如果T细胞活性受到抑制，对B细胞的活化及抗

体的产生均有一定影响，如果能有阻断抗体产生这一关键致病环节，减少抗原

抗体持续作用带来的慢性炎症，有望解决红肉Neu5Gc引发的食肉安全难题。

+

EarlypregnancyfactorEPFCD4T

研究发现，早孕因子（，）可以减少细胞

黏附分子的表达及其分泌量，下调T细胞活性，使胎儿在母体内不被当作异物

清除，被认为是一种温和的免疫抑制因子。最早是由澳大利亚研究员Morton在

怀孕小鼠血清中首次发现，是目前最早确认母体妊娠的生化指标之一。现已广

泛用于早孕诊断、胎儿检测以及自身免疫疾病的治疗等。

鉴于EPF特殊的免疫抑制功能以及抗体生成中T\B细胞的相互活化关系，

探讨EPF通过抑制Th细胞活化，能否使B细胞抗体合成受阻，从而减弱因抗

体和Neu5Gc相互作用导致的慢性炎症。本研究首先克隆EPF蛋白编码核酸序

列，通过原核表达系统，诱导表达SUMO-EPF重组蛋白（srEPF）和去除抑制

EPF10kDEPF

区的（）蛋白并进行纯化，制备并纯化的抗体；并在细胞水平上

通过玫瑰花环抑制试验验证其活性；以CMAH基因缺失小鼠作为模拟人体的模

EPFNeu5Gc

型动物，探讨对诱发的慢性炎症的作用效果。

结果表明，成功表达并纯化srEPF和EPF（10kD）蛋白，获得高纯度、高

I

特异性的EPF抗体，能和EPF蛋白发生特异性结合；体外条件下，通过抑制玫

瑰花环的形成，表明EPF发挥了较好的免疫抑制功能；建立红肉Neu5Gc介导

的动物模型，经EPF干预后可缓解小鼠体重增长缓慢和结肠长度缩短的状况，

ELISA结果显示，注射EPF后，显著降低了体内抗Neu5Gc抗体的水平，减少

了体内炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量和MPO活性，HE染色结果显示，

EPF治疗后，肝脏和肠组织的病变情况有所缓解；免疫组化观察小鼠体内CD4

淋巴细胞发现，与炎症促进组相比，EPF组CD4细胞含量明显降低，且荧光定

量结果表示EPF处理后小鼠体内B细胞活化分子CD80和CD86分子数量有所

EPFCD4B

下降，表明可能通过抑制淋巴细胞，干预细胞活化信号的传递，进

而影响体内抗Neu5Gc抗体的产生，减轻由红肉Neu5Gc引起的机体炎症。