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中文摘要

miRNA-216b与乳腺癌关系的研究

乳腺癌（breastcancer，BC）是发病率最高的女性恶性肿瘤，且发病率增长

速度居高不下。70%以上BC患者为LuminalA（ER+、PR+）型BC患者，在使

用内分泌治疗最常用药物——他莫昔芬（tamoxifen，TAM）治疗后预后较好，

但TAM耐药型乳腺癌及三阴型乳腺癌（TripleNegativeBreastCancer，TNBC）

具有预后不良的特点。癌症的发展进程中会伴随miRNA的表达变化，已证实

miRNA-216b与恶性程度较高的癌症分型有关且表达水平变化会在BC中发挥抑

癌或促癌作用。但目前关于miRNA-216b在BC发展进程与BC患者预后及临床

指标的关系研究尚不充分。

目的：

本研究通过检测不同类型BC患者中miRNA-216b表达水平与临床指标之间

的关联，结合miRNA-216b在不同类型细胞中的功能并筛选其可能的靶基因，为

miRNA-216b能否成为BC患者潜在诊断及预后标志物提供理论依据。

方法：

使用TCGA数据库和Kaplan-Meierplotter数据库明确miRNA-216b在BC患

者中的表达水平及其与不同类型BC患者生存的关系。

RT-qPCR技术明确miRNA-216b在不同BC细胞系中的表达水平。分别采用

MTS法进行细胞增殖实验、woundhealing细胞划痕实验、小室穿孔实验和流式

细胞术明确miRNA-216b对MCF7、LCC2、MDA-MB-231细胞生物学功能的影

响。

使用R语言4.0.3进行差异表达基因分析（DifferentiallyExpressedGenes，

DEGs）。通过TaegetScan、miRbase、mi-RDB三个数据库预测miRNA-216b的

靶基因并与DEGs分析结果取交集得到差异表达的靶基因。对具有表达差异的靶

基因进行GO富集分析以及KEGG通路分析。将与研究目的相关的通路上的基

因进行提取并在TCGA数据库中对差异表达的靶基因在不同BC分型人群中的差

异表达及生存进行分析。

I

结果：

1.miRNA-216b与乳腺癌患者预后的关系

通过Kaplan-Meierplotter数据库进行生存分析结果：在总体BC患者和ER+

型乳腺癌患者中miRNA-216b高表达者总生存（Overallsurvival，OS）时间短[BC：

HR=1.86(1.34-2.59)，P=0.00019；ER+型乳腺癌：HR=7.45(2.78-19.97)，P0.001]，

miRNA-216b与HER2阳性型BC患者生存关系不具有显著性(P=0.1),在TNBC

患者中miRNA-216b高表达者OS时间长（TNBC：HR=0.21(0.07-0.64)，P=0.0025）

2.miRNA-216b对ER+型乳腺癌和TNBC型细胞功能的影响

细胞功能实验结果表明：在MCF7细胞中，经miRNA-216bmimic转染后，

与mimicNC组相比，细胞增殖、迁移、侵袭能力增加（P0.01），而细胞凋亡

受到抑制（P0.001）；经miRNA-216binhibitor转染后，与inhibitorNC组相比，

细胞增殖、迁移、侵袭能力受到抑制（P0.01），而细胞凋亡增加（P0.01）。

在LCC2和MDA-MB-231细胞中经miRNA-216bmimic转染后，与mimicNC组

相比，细胞增殖、迁移、侵袭能力受到抑制（P0.05），而细胞凋亡增加（P0.001）；

经miRNA-216binhibitor转染后，与inhibitorNC组相比，细胞增殖、迁移、侵

袭能力增加（P0.01），而细胞凋亡受到抑制（P0.01）。可以证明miRNA-216b

在非TAM