抗原抗体反应的原理.ppt

********************************************可溶性抗原的制备与纯化1、处理与粉碎2、蛋白质分离3、单一组分提取4、抗原纯度鉴定第31页，课件共50页，创作于2023年2月处理与粉碎组织粉碎：机械、生物细胞破碎：物理、化学、生物第32页，课件共50页，创作于2023年2月蛋白质分离选择性沉淀：盐析有机溶剂沉淀水溶性非离子型聚合物沉淀透析技术：超滤技术：第33页，课件共50页，创作于2023年2月单一组分提取层析技术：凝胶过滤离子交换亲和层析离心技术：差速离心密度梯度离心电泳技术：电泳洗脱等电聚焦第34页，课件共50页，创作于2023年2月凝胶层析（分子筛）第35页，课件共50页，创作于2023年2月离子交换层析+++———————++++++++——+++——++第36页，课件共50页，创作于2023年2月亲和层析第37页，课件共50页，创作于2023年2月抗原纯度鉴定方法：层析性质测定电泳法免疫法指标：电泳纯免疫纯第38页，课件共50页，创作于2023年2月第三节半抗原免疫原制备的方法一、载体的选择二、半抗原与载体的联接第39页，课件共50页，创作于2023年2月载体的选择蛋白质载体：BSA、HAS、OVA、KLH聚合多肽载体：多聚赖氨酸高分子聚合物载体：PVP、羧甲基纤维素第40页，课件共50页，创作于2023年2月半抗原与载体的联接1、连接方式：物理法（吸附）化学法2、化学连接方法：直接联接法：间接联接法：第41页，课件共50页，创作于2023年2月半抗原与载体直接联接碳化二亚胺法蛋白质-COO—+R-N+=CN-R`H-N+-R蛋白质-COO-C-NH-R`+半抗原-NH2O蛋白质-C-NH-半抗原+R-NH-CO-NHR`第42页，课件共50页，创作于2023年2月半抗原与载体直接联接戊二醛法蛋白质-NH2+半抗原-NH2+COH-（CH2）3-COH蛋白质-N=CH-（CH2）3–CH=N-半抗原第43页，课件共50页，创作于2023年2月半抗原与载体直接联接氯甲酸异丁酯法半抗原-COOH+Cl-COO-CH2CH（CH3）2OO半抗原-C-O-C-O-CH2CH（CH3）2+蛋白质-NH2半抗原-CO-NH-蛋白质+HO-CH2CH（CH3）2第44页，课件共50页，创作于2023年2月半抗原与载体间接联接琥珀酸酐法OO半抗原-CH2–OH+C-O-CCH3CH3O半抗原-CH2–O-C-(CH2)2-COOH第45页，课件共50页，创作于2023年2月半抗原与载体间接联接O-（羟甲基）羟胺法半抗原-C=O+H2N-O-CH2-COOH半抗原-C=N-O-CH2-COOH