临床检验仪器第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题.pdf

第十三章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪

一、名词解释

5′

1.荧光标记引物法：将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的端，称为荧光

标记引物法。

2.荧光标记终止底物法：将荧光染料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上，

称为荧光标记终止底物法。

3.多色荧光标记引物法：是DNA测序反应常用的一种荧光标记方法。将荧光染料

5′

预先标记在测序反应所用引物的端，当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分

别被4种荧光染料标记后，便形成了一组（4种）标记引物。特定颜色荧光标记的

引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系。

4.多色荧光标记终止底物法：是DNA测序反应常用的一种荧光标记方法。将荧光染

料标记在作为终止底物的双脱氧单核苷酸上。反应中将4种ddNTP分别用4种不同

的荧光染料标记，带有荧光基团的ddNTP在掺入DNA片段导致链延伸终止的同时，

3′

也使该片段端标上了一种特定的荧光染料。根据荧光颜色的不同来判断所代表

的不同碱基信息。

是检测蛋白质一级结构的方法。在弱碱条件下，多肽链N末端NH

5.Edman降解法：2

与PITC反应，生成PTC－多肽。在无水强酸如三氟醋酸的作用下，可使PTC－多

肽形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽。剩余多肽链可以进行下

一次以及后续的降解循环。如此不断循环，可依次使多肽链的氨基酸逐一降解，

形成ATZ衍生物。ATZ衍生物经水溶酸处理转化为稳定的PTH氨基酸。

6.Sanger双脱氧链末端终止法：是检测DNA序列的一种方法。其原理是利用PCR，

但反应体系中除了dNTP外，还有ddNTP。ddNTP可掺入到正在延伸的DNA链中，

但不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA链在此终止。由于

存在ddNTP与dNTP的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。

7.平板电泳型DNA测序仪：为DNA测序仪的一种类型。平板型电泳的凝胶灌制在两块

玻璃板中间，聚合后厚度一般小于0.4mm或更少，因此又称为超薄片层凝胶电泳。

它具有样品判读序列长（600bp～900bp）、一块凝胶板上可同时进行多个样品测序的

优点。

8.毛细管电泳型DNA测序仪：为DNA测序仪的一种类型。将凝胶高分子聚合物灌

制于毛细管中（内径50m～100m），在高压及较低浓度胶的条件下实现DNA片

段的快速分离。

9.缩微生物处理器：是一种新型DNA自动测序装置。其基本结构为3层玻璃薄片和

一层聚二甲基硅氧烷薄片，各层间紧密粘合形成圆盘状，直径仅10厘米。在

这些薄片之间有各种反应小室、毛细管电泳通道和微瓣膜，可完成纳升级标本

的SangerDNA测序。

二、选择题

【A型题】

1.DNA的一级结构是指（B）

A.DNA空间构象

B.核苷酸序列

C.碱基序列

D.氨基酸序列

E.DNA双螺旋结构

2.下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（C）

A.加入的核苷酸单体为2’-脱氧核苷三磷酸

B.低温退火时，引物与模板形成双链区

C.沿着3’-5’的方向形成新链

D.DNA聚合酶结合到DNA双链区启动DNA的合成

E.形成的新生连与模板完全互补配对

3.双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（E）

A.DNA聚合酶不同

B.dNTP的种类不同

C.dNTP的浓度不同

D.引物不同

E.双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP

4.下述荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应放在同一管中完成而

不影响测序结果的是（D）

A.单色荧光标记引物法

B.单色荧光标记终止底物法

C.多色荧光标记引物法

D.多色荧光标记终止底物法

E.多色荧光标记法

5.下述那一荧光标记法，必须将A、T、C、G四个测序管分管进行，但可以合并

在一