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关于石楠大孔粉虱

Dialeuroporaphotiniana分类归属的探讨

白润娥，胡维月，闫明辉，刘旭，杨昊，闫凤鸣

(河南农业大学植物保护学院，河南郑州450002)

石楠大孔粉虱Dialeuroporaphotiniana，属于半翅目(Hemiptera)粉虱科(Aleyrodidae)粉虱亚科(Aleyrodinae)大孔粉虱属(Dialeuropora)。杨平澜于1985年首次对该种进行了鉴定，认为是一种隶属于复孔粉虱亚科Aleurodicinae复孔粉虱属Aleurodicus的新种，因采于石楠植物，因而命名为石楠盘粉虱Aleurodicusphotiniana，但没有见论文发表和具体的形态描述。陈连根于1997年详细描述了该种的形态特征、生活史和生物学特性[1]。

石楠大孔粉虱D.photiniana对寄主植物的危害是多方面的，表现在若虫、伪蛹

和成虫在寄主植物背面刺吸汁液，使被害叶片发黄，提早脱落；分泌大量蜡质絮状物影响寄主植物的光合作用，以及若虫分泌的蜜露诱发煤污病，严重影响寄主植物的正常生长和景观效果等[2]。

2006年，DUBEY和KO根据上海植物园保存的标本以及陈连根的特征描述将该种归属至粉虱亚科(Aleyrodinae)大孔粉虱属(Dialeuropora)，并将其命名为Dialeuroporaphotiniana(Young)[3]。MARTIN[4]、EVANS[5]、王吉锐[6]也认同此观点。目前国内对于粉虱类昆虫的研究主要集中在种类鉴定、地理分布、寄主植物以及防治研究等方面，而对粉虱分类中存在的分歧关注较少，因此大多研究者仍沿用杨平澜最初鉴定的种名A.photinianaYoung[1,7-10]。DUBEY和KO对石楠大孔粉虱归属的变更是否正确，有待提出科学有力的证据。本文研究了石楠大孔粉虱的伪蛹、成虫特征，以及分子鉴定结果，以期对其分类地位的归属提供科学依据。

材料与方法

标本采集

石楠大孔粉虱标本分别于2016年4月采集于河南省郑州市郑东新区如意路，寄主植物石楠PhotiniaserrulataLindl；2016年7月采集于郑州大学新校区，寄主植物石楠P.serrulata和西府海棠Malusmicromalus；2017年5—7月采集于河南农业大学文化路校区，寄主植物石楠P.serrulata。经鉴定并与陈连根保存于上海植物园的玻片标本对比，确定为同一种。

标本的形态鉴定

粉虱科昆虫分类所依据的形态标准，在科和亚科水平上主要依据成虫和第四龄若虫(伪蛹)的特征，族、属和种水平上的分类主要根据第四龄若虫的特征进行鉴定[7]。

将带有成虫的叶片，放入-20℃冰箱冷冻5～10min，挑取成虫备用；带有若虫的叶片，用软毛笔轻轻刷去蜡丝，选取第四龄若虫，备用。将成虫和第四龄若虫利用VHX-600超景深显微镜(基恩士(中国)有限公司)、S-3400NⅡ扫描式电子显微镜(日立(中国)有限公司)进行观察、拍照。

粉虱玻片标本的制作粉虱玻片标本制作参照闫凤鸣[11]，乔鲁芹和张小娣[12]，吴杏霞和胡敦孝[13]的玻片制作方法，采用碱液浸泡、染色、酒精梯度脱水和透明等步骤进行。

粉虱及粉虱玻片的观察用VHX-600超景深显微镜在低倍镜(200倍)下，对自然状态下的粉虱和制作的粉虱玻片标本进行测量和观察，并拍照。

伪蛹的观察取带有伪蛹的干燥叶片，在体视显微镜下观察，选用形态完整伪蛹(如果伪蛹周围或伪蛹上附着有蜡丝，可以用软毛笔将蜡丝轻轻刷去)，将其连同叶片剪成小方块，用导电胶将样品粘贴在样品台上，选取适当的工作参数，用S-3400NⅡ扫描式电子显微镜进行观察、扫描并拍照[14-15]。

标本的分子鉴定

石楠大孔粉虱总DNA提取石楠大孔粉虱总DNA的提取参照乔玮娜等[16]的方法，并稍加改进。用软毛笔挑取单头粉虱成虫，置于滴有20μL提取缓冲液(50mmol·L-1Tris-HCl，1mmol·L-1EDTA，1%CTAB，20mmol·L-1NaCl；pH8.0)的Parafilm膜上，用0.2mLPCR管底部作为匀浆器，研磨匀浆，匀浆液移入1.5mL离心管；用50μL缓冲液冲洗匀浆器和Parafilm膜4次，移入同一离心管；加入5μL蛋白酶K(20mg·mL-1)混匀，置于60℃水浴锅中水浴1h(中途混匀1次)；加入氯仿和异戊醇(V∶V=24∶1)混合液220

μL，混匀8～10次后，冰浴30min；在4℃条件下，以12000r·min-1，离心20min(德国Hettich