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蒽酮比色法测总糖:
实验步骤:
1、可溶性糖的提取:准确称取烟叶样品0.100克,置于离心管中,加入8毫升80%乙醇,于80
2、总糖的测定:取提取液1毫升(或0.5毫升,视情况而定)于试管中(空白中用1毫升蒸馏水代替),加入蒽酮试剂5毫升,摇匀,于
,冷却后在620nm波长处比色。
蒽酮试剂:1克蒽酮溶于72%的H2SO41000ml(98%的H2SO4+240的蒸馏水),棕色瓶冰箱保存2~3周。
3、标准曲线的绘制:取干洁试管6支,依次加入葡萄糖标准液(100μg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml和蒸馏水1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0ml,再分别加入蒽酮试剂5毫升,于沸水浴中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色,记录OD值,绘出标准曲线。
4、计算:C=AN/W
C—样品总糖含量(μg/g)
W—样品重量(g)
A—标准曲线查得的糖量(μg)
N—样品提取液占样品反应液的倍数
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