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脐血诱导分化树突状细胞WT1基因的转染及其功能的研究的任务书
任务书：
一、背景
树突状细胞（dendriticcell，DC）是免疫系统中最重要的一类抗原呈递细胞，具有高效的抗原获取、处理和呈递能力。近年来，树突状细胞作为肿瘤免疫治疗的重要细胞类型，被广泛研究，其能够通过吸收抗原、处理抗原并呈现给T细胞等多种方式激发特异性免疫应答，成为肿瘤治疗上的热点。WT1（Wilmstumor1）是人肿瘤干细胞的标志物，也被认为是肿瘤免疫疫苗研究的理想抗原。近期的研究表明，WT1蛋白对树突状细胞的活化、成熟和抗原呈递产生调控作用，但目前有关WT1基因对树突状细胞的影响及其作用机理仍然缺乏系统研究。
二、研究内容
本研究旨在通过脐血诱导分化获得人类树突状细胞，并利用基因转染技术向树突状细胞中转染WT1基因，进而观察WT1基因在树突状细胞成熟、抗原呈递等方面的影响及其作用机理。
具体实施步骤如下：
1.脐血诱导分化获得树突状细胞
2.建立WT1基因转染实验体系
3.观察WT1基因转染对树突状细胞表型特征的影响
4.研究WT1基因转染对树突状细胞成熟的影响
5.研究WT1基因转染对树突状细胞抗原呈递的影响
6.分析WT1基因对树突状细胞功能的影响机理
三、研究方案
1.研究对象：脐血诱导分化获得的树突状细胞
2.主要实验方法：细胞培养、基因转染、流式细胞术、ELISA检测等
3.预期结果：观察WT1基因转染后树突状细胞表型特征、成熟程度、抗原呈递能力等方面的变化，并探讨WT1基因对树突状细胞作用的机制。
四、时间安排
1.前期准备：2个月
2.树突状细胞培养及分化：1个月
3.建立WT1基因转染实验体系：1个月
4.观察基因转染对树突状细胞表型特征的影响：1个月
5.观察基因转染对树突状细胞成熟的影响：1个月
6.观察基因转染对树突状细胞抗原呈递的影响：1个月
7.分析WT1基因对树突状细胞功能的影响机理：2个月
8.撰写毕业论文：2个月
五、参考文献
1.ZhuZY,ShiHZ,LuJH.WT1-reservedpeptidesinduceCD8+andCD4+Tcellresponses,includingacytotoxicT-cellresponse,inHLA-A*0201andHLA-A*2402healthydonorsandpatientswithleukemia.HumImmunol.2012,73(1):56-62.
2.LuZJ,ZhouDW,TaoYZ,GongJN,HuoYM,TangM,etal.Dendriticcellstransducedwithlentiviral-mediatedWT1genemarkedlyenhanceWT1-specificimmuneresponsesexvivo.Cytotherapy.2010,12(8):1007-1014.
3.NakatsukaS,OjiY,HoriuchiT,KandaT,KitagawaM,TakeuchiT,etal.ImmunohistochemicaldetectionofWT1proteininavarietyoftumortypes.ModPathol.2006,19(6):804-814.
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