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重组大肠杆菌化学裂解法的建立及其对重组蛋白纯化的影响的中期报告
摘要:
本研究建立了一种适用于重组大肠杆菌的化学裂解法,并探讨了该裂解方法对于重组蛋白纯化的影响。通过比较化学裂解法与传统的机械裂解法,发现化学裂解法可以更高效地将蛋白质释放到细胞外部。同时,化学裂解法也可以降低蛋白质在裂解过程中的部分降解,并且可以减少杂质的产生。
在纯化重组蛋白的过程中,使用该化学裂解法裂解表达菌株并对裂解液进行富集和分离,得到了高纯度的重组蛋白。结果表明,此化学裂解法不仅能够提高重组蛋白的产量,同时也可以提高纯度。
此外,本研究也探讨了化学裂解法对于不同类型的蛋白质在纯化过程中的影响,并发现此方法对于某些易降解的蛋白质可以起到保护作用,避免因长时间操作和多次处理导致的蛋白质降解。
综上所述,本研究所建立的化学裂解法为重组蛋白的纯化提供了一种高效、可靠且可行性的选项。
Abstract:
Inthisstudy,achemicallysismethodsuitableforrecombinantEscherichiacoliwasestablished,andtheeffectofthislysismethodonthepurificationofrecombinantproteinswasexplored.Bycomparingthechemicallysismethodwiththetraditionalmechanicallysismethod,itwasfoundthatthechemicallysismethodcanreleaseproteinsmoreefficientlyintotheextracellularspace.Atthesametime,thechemicallysismethodcanalsoreducepartialdegradationofproteinsduringthelysisprocessandreduceimpurityproduction.
Intheprocessofpurifyingrecombinantproteins,theexpressionstrainwaslysedwiththechemicallysismethod,andthelysatewasenrichedandseparatedtoobtainhigh-purityrecombinantproteins.Theresultsshowedthatthischemicallysismethodnotonlycanincreasetheyieldofrecombinantproteinsbutalsocanimprovethepurity.
Inaddition,thisstudyalsoinvestigatedtheeffectofthechemicallysismethodondifferenttypesofproteinsinthepurificationprocessandfoundthatthismethodcanprotectcertaineasilydegradableproteinsfromdegradationcausedbylong-termoperationandmultipletreatments.
Insummary,thechemicallysismethodestablishedinthisstudyprovidesahighlyefficient,reliable,andfeasibleoptionforthepurificationofrecombinantproteins.
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