SN∕T 5125-2019 水生动物副溶血弧菌和霍乱弧菌双重实时荧光检测方法.pdf

ICS11.220

B41

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T5125-2019

水生动物副溶血弧菌和霍乱弧菌双重实时

荧光检测方法

Duplexreal-timePCRforVibrioParahaemolyticusandVibrioCholerae

inAquaticanimals

2019-09-03发布2020-03-01实施

中华人民共和国海关总署发布

SN/T5125-2019

目。吕

本标准根据GB/T1.1-2009的妥求编写。

本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和困上海海关，中国农业科学院上海兽医研究所。

本标准主要起草人：王艳、蒋蔚、黄忠荣、王权、熊炜、李健。

SN/T5125-2019

水生动物副溶血弧菌和霍乱弧菌双重实时

荧光检测方法

1范围

本标准规定f水生动物中副溶血弧菌和霍乱弧菌的双吊：实时荧光PCR快速检验方法。

木标准适用于水生动物中副辩血弧曲和霍乱弧菌的快速检验。

2规范性引用文件

下列文件对于本文｛牛的耐用是必不叫少的。凡是注日期的引用文件，仪所注日期的版牛二适用于本

文件。凡是不注U期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.7食品安全回家标价食品微生物学检验副帘血性弧菌检验

GU/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3缩略i吾

下列缩略语适用于本文件。

3.1实时荧光定量PCR

实时荧光聚合酶链式反应u

3.2Ct值

每个反应管内的荧光信号达到设定的阔值所经历的循环数。

3.3DNAdeoxyribonucleicacid

脱氧核糖核酸。

3.4Taq酶

TaqDNA聚合酶。

3.5V.Cholerae

霍乱弧菌。

3.6V.Parahαemolyticus

副浴血弧商。

4仪器与耗材

4.1全自动荧光定量PCR仪。

1

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4.2

高速台式冷冻离心机。

4.3

普通台式离心机。

4.4油在涡』民荡器。

4.5

均质撑。

4.6

冰箱：4℃±1℃，20℃±2℃。

4.7

做量可调移液器及配套版头。

4.81.5n汀，Eppendorf管。

4.910mL肖心管。

4.10灭南样品处理器具：剪子、慑子。

4.11

一次性于套。

4.12

生物安伞柜。

5主要试剂

除特别说明以外，所用试剂均为分析纯，实验用水为双蒸水。（见GB/T6682)

5.13%氯化创碱性蛋们陈水：见附注A中A.lo

5.2灭菌双蒸水。

6操作方法

6.1样品制备

6.1.1鱼类和头足类动物取表面组织、肠或魄。贝类取全部内容物，包括贝肉和体液；吁l壳类取整个动

物，或者动物的中心部分，包括肠和魄。如为带壳贝类或甲亮类，则应先在自来水中洗刷外壳并甩干表

面水分，然后以无菌操作打开外壳．按上述要求取相应部分。

6.1.2以无菌操作取样品25g(111L），加入3%氯化铀碱性蛋白陈水225mL，用旋转刀片式均质器以

8000r/min均质1min，