SN∕T 5177-2021 国境口岸寨卡病毒实时荧光RT-PCR检测方法.pdf

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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SNIT5177-2!..卫1

国境口岸寨卡病毒实时荧光RT-PCR

检测方法

Real-timeRT-PCRmethodfordetectingZikaVirusatfrontierpor臼

2021-06-18发布2022-01-01实施

中华人民共和国海关总署发布

SNff5177-2021

前言

本文件按照GB厅1.1-2020《标准化工作导则第一部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。

本文件起草单位2中国检验检疫科学研究院、杭州富集生物科技有限公司。

本文件主要起草人：如j丽娟、王静、张晓龙、慈颖、马爱敏、曹晓梅、杨字、张丽挥、胡孔新。

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SNff5177-2021

国境口岸寨卡病毒实时荧光RT-PCR

检测方法

1范围

本文件规定了国境口岸寨卡病毒实时荧光RT-PCR检测方法的生物安全要求，样本的采集、运

输、寨卡病毒实时荧光RT-PCR检测方法和现场快速检测方法。

本文件适用于国境口岸人出境人员疑似寨卡病毒的核酸检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）租

用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

WS!f230临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用

人间传染的病原微生物名录（中华人民共和国卫生部卫科教发〔2刷〕15号）

可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定（中华人民共和国卫生部令第

45号）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1寨卡病毒Zikavirus

一种黄病毒研斗黄病毒属病毒，呈球形，直径约为40run-70run，有包膜。基因组为单股正链RNA,

长度为10.8毡，分为亚洲型和非洲型。寨卡病毒抵抗力不详，但黄病毒属病毒一般不耐酸、不耐热，

ω℃30mi且可灭活，70%乙醇、0.5%次氯酸销、脂溶剂、过氧乙酸等消毒剂及紫外照射均可灭活。

3.2逆转录聚合酶链反应『＇aversetransc『iptionpolymerasechainreaction,RT-PCR

将RNA的逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。本标准采用一步法

逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。在一步法RT-PCR中，首先以RNA为模板，利用下游特异性引物，

在依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）的作用下转录合成互补DNA(cDNA），该步骤称作“逆转录”；

随后，再以cDNA为模板，利用上游和下游特异性引物，在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增；

最终使RNA分子的某个特定区域（目的片段）被扩增达几百万倍。

3.3实时荧光RT-PCRreal-timefluorescenceRT-PCR

在常规RT-PCR的基础上，加入一条特异性的荧光探针。该探针为一段寡聚核背酸，