14 色谱分析法 (上).ppt

色谱法是利用物质在两相中吸附或分配系数的差异达到分离的目的。不同的物质有着不同的分配系数K。K值越小，移动的速度就越快，即保留时间越短，将先被分离出来；K值越大，移动速度就越慢，即保留时间越长，则后被分离出来。色谱法的分类（一）按流动相和固定相所处的状态分类液相色谱法、气相色谱法（二）按操作形式分类柱色谱法、薄层色谱法及纸色谱法（三）按分离机制分类吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法色谱分离原理色谱法的分离机制1.吸附色谱2.分配色谱3.离子交换色谱4.分子排阻色谱1．柱色谱的操作步骤和各步骤注意事项1）装柱；均匀、无气泡。2）上样；样品液应浓度高、体积小。3）洗脱；控制适当的洗脱速度，通常采用梯度洗脱，吸附剂不能露出洗脱剂液面。4）定性与定量分析。2．薄层色谱的操作步骤和各步骤注意事项1）铺板：玻片要干净、四边整齐，铺好的薄板要均匀、无气泡、无裂痕、拐角要铺到。2）活化：自然凉干后再加热活化，控制活化温度。3）点样：点样用的毛细管不能混用，点样量要适当，原点直径控制在2mm～3mm内为好。2．薄层色谱的操作步骤和各步骤注意事项4）展开：原点不能浸入展开剂中，展开剂蒸汽要饱和。5）斑点定位：应根据被分离组分的性质及薄板的状况来选择合适的显色剂及显色方法。6）定性与定量分析：３．纸色谱的操作步骤和各步骤注意事项1）滤纸的选择与处理：滤纸质地要纯，边缘要整齐，有一定的机械强度。2）点样：注意事项同薄层色谱。3）展开：注意事项同薄层色谱。4）斑点定位：注意事项同薄层色谱。5）定性与定量分析：色谱法的产生与发展：色谱法出现于20世纪初，1906年，俄国植物学家茨维特对植物色素进行分离，得到不同颜色的色带，色谱法因此而得名。分析化学基础化学教研室王雷清色谱分析法分类俄国植物学家茨维特在1906年使用的色谱原型装置，如图。色谱法是一种分离技术，其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。色谱分析法分类一、色谱法概念：色谱法又名层析法，是一种依据物质的物理化学性质的不同（如溶解性、极性、离子交换能力、分子大小等）而进行的分离分析方法。色谱分析法分类二、色谱法的分类（一）按流动相和固定相所处的状态分类液相色谱法、气相色谱法（二）按操作形式分类柱色谱法、薄层色谱法及纸色谱法（三）按分离机制分类吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法色谱分析法分类气相色谱：流动相为气体（称为载气）。按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱。色谱分析法分类液相色谱：流动相为液体（称为淋洗液）按固定相不同分为：液固色谱和液液色谱离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。色谱分析法分类平面色谱：薄层色谱和纸色谱比较简单的色谱方法色谱分析法分类色谱法的特点（1）分离效率高复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。（2）灵敏度高可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。（3）分析速度快一般在几分钟或几十分钟内可完成一个试样的分析。（4）应用范围广色谱分析法分类分析化学基础化学教研室王雷清色谱分离原理1.按色谱分离机制分类（1）吸附色谱法（2）分配色谱法（3）离子交换色谱法(IEC)（4）分子排阻外色谱法(MEC)2.按操作形式不同分类（1）柱色谱法（2）平面色谱法①薄层色谱法②纸色谱法色谱分析法分类色谱过程示意图吸附剂对A组分的吸附能力弱，则该组分移动速度快，先被洗脱流出色谱柱；吸附剂对B组分的吸附能力强，则该组分移动速度慢，后被洗脱流出色谱柱。色谱过程示意图色谱图（流出曲线）AB色谱分离原理色谱过程示意图1.试样2.流动相3.固定相4.色谱柱5.检测器(一)色谱过程色谱法是一种分离分析技术。它利用物质在两相中吸附或分配系数的差异达到分离的目的。当两相做相对移动时，被测物质在两相间进行反复多次的分配，这样使原来微小的分配差异放大了，进而产生了很大的分离效果，达到分离、分析的目的。色谱分离原理（二）分配系数色谱过程的