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呼吸道标本的培养与鉴定
人体的上呼吸道有常居的细菌群,下呼吸道是无菌的。上呼
吸道常居菌主要有:草绿色链球菌、α、β链球菌、微球菌、表
皮葡萄球菌、拟杆菌、梭杆菌、口腔厌氧球菌、奈瑟菌(致病菌
除外)等。
1.下呼吸道感染的病原菌种类因感染部位而有所差异。
(1).咽炎最常见的病原菌是A群链球菌;
(2).喉炎的病原菌以流感嗜血杆菌为主;
(3).中耳炎常见病原菌为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫
拉菌及口腔厌氧菌;
(4).社区获得性下呼吸道感染的常见病原菌包括肺炎链球菌、
流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、肺炎衣原体、肺炎支原体、卡他
莫拉菌、化脓性链球菌、结核分枝杆菌、嗜肺军团菌、诺卡菌等,
金黄色葡萄球菌可引起社区获得性、进行性、坏死性肺部病变;
(5)长期使用广谱抗菌药物及激素、粒细胞减少的患者容易受到
侵袭性真菌的感染。
2.检验方法与程序
通常用鼻咽拭子采集标本。痰和支气管灌洗液用无菌痰杯留
取。应由临床医生指导留取。痰标本及上呼吸道拭子标本应在2
小时内送到实验室。
3.涂片检查
直接涂片、革兰染色、镜检。痰液标本每低倍视野上皮细胞应
小于10个,白细胞应大于25个。还可以初步判定是否有病原菌
存在及病原菌的种类。比如,念珠菌可直接在高倍镜下检查孢子
及菌丝。
4.细菌培养通常采用分区划线接种的方法进行标本的初次接
种。①血平板适用于分离各类细菌,特别是β溶血性链球菌
②巧克力平板于5%co2环境下分离嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟
菌或淋病奈瑟菌
③中国蓝/麦康凯平板用于分离革兰氏阴性杆菌
④沙氏平板用于分离念珠菌及其他酵母菌或真菌
⑤厌氧血平板放厌氧环境,分离厌氧菌
⑥罗-琴培养基或米氏7H10培养基,用于结核分枝杆菌的培
养。
35℃培养18-24小时,观察细菌菌落形态及特点,呼吸道标
本中的常居菌群不用鉴定,培养后生长于平板第二区或第三区的
中等或大量细菌,或仅在第一区生长的纯种细菌,都是需要鉴定
的细菌。若无致病菌或呼吸道正常菌群生长,可能提示正常菌受
抗菌药物的抑制。标本运送和处理的延迟会使培养结果为假阴性。
对痰液中检出的呼吸道常居菌虽不做鉴定,但在报告时给予说明,
当其为生长优势菌时(均占90%以上)可做鉴定和报告。经过鉴
定确认为呼吸道重要病原菌时,应作出培养阳性的结果报告。
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