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蛋白质相互作用：2021精选ppt1本身具有生物学意义：这样的相互作用在生物体中是起什么作用的发展技术：利用这样的相互作用创造出一些人为的作用
研究蛋白质相互作用的目的是发现并明确其相互作用的生物学意义蛋白质相互作用是一种表象，通过表象分析规律，是研究蛋白质相互作用的核心“种瓜得瓜，种豆得豆”是一种表象，反映了遗传这样一种本质现象 可研究对象 合适的研究方法2021精选ppt2
研究蛋白质相互作用需要微观和宏观的结合2021精选ppt3象与象的一部分
定量分析是研究蛋白质相互作用的基础Input：10~20?gtotalproteinsIPsample：Immunoprecipitatedfrom1000?goftotalproteins2021精选ppt4
定量分析是研究蛋白质相互作用的基础Relativeexposurelevel2021精选ppt5
研究蛋白质相互作用的意义1、蛋白质间的相互作用是细胞生命活动的基础。2、基因只是决定蛋白质，而蛋白质才是发挥作用的主体。蛋白质的相互作用是发挥其功能的主要活动。2021精选ppt6
稳定相互作用形成蛋白质复合体瞬时相互作用2021精选ppt7（proteincomplex）（enzyme-substrate）生物学效应稳定的相互作用与瞬间的相互作用共同构成蛋白质相互作用的内涵。
研究蛋白质相互作用是为了研究相应的生物学功能确定研究目标寻找相互作用建立相互作用网络和功能体系82021精选ppt
从蛋白质相互作用到生物学功能。运用蛋白质直接相互作用，发现相互作用蛋白质，再分析这些作用的生物学意义。容易犯的错误：研究一大堆的蛋白相互作用，却不知道这些相互作用有什么生物学意义。从物学功能到蛋白质相互作用。通过改变生物学现象，分析蛋白质间的遗传相互作用，进一步研究相关蛋白质的相互作用。容易犯的错误：找到了平行变化的不相关蛋白质。92021精选ppt
发现蛋白质相互作用蛋白质-蛋白质直接相互作用遗传功能分析序列与结构比较模拟验证蛋白质相互作用不同方法的交叉验证不同生物体系中验证2021精选ppt10
ProteininteractionAffinity: A+B=ABKd=[A][B]/[AB], Kd: dissociationconstantInteraction Kd2021精选ppt11Streptavidin-biotinbindingAntibody-antigeninteraction(good)Antibody-antigeninteraction(weak)Enzyme-substrate10-14M10-8-10-10M10-6M10-6-10-10M蛋白质-蛋白质直接相互作用
蛋白质-蛋白质直接相互作用2021精选ppt12Co-immunoprecipitationandantigen-antibodyinteraction（免疫共沉淀和抗原抗体结合）Affinityinteraction（亲和作用）Yeasttwo-hybridandphagedisplay（酵母双杂交和噬菌体展示）SurfacePlasmonResonanceFRETProteomicanalysis（蛋白质组学技术）
Co-immunoprecipitationandantigen-antibodyinteraction（免疫共沉淀和抗原抗体结合）2021精选ppt13Western blot：变性抗原，主要用于检测蛋白质的存在与否。免疫共沉淀：非变性抗原，用于鉴定不同蛋白质间的相互作用。免疫共沉淀：Ab－Pr1－Pr2非特异性结合：Pr1－Ab－Pr2抗体筛库：cDNA表达库，抗体结合表达的蛋白质，从而得到基因。已经被质谱和PCR所淘汰
Western blot1、电转移效率2、PVDF膜的充分浸润3、转移液中有太多的SDS4、膜的损坏5、转移时胶和膜没有完全接触6、抗体的问题7、抗体的浓度太高或太低8、还原性物质的存在9、封闭不充分2021精选ppt14
SDS－PAGE acrylamide的浓度蛋白质上样的量相邻泳道的蛋白质量、离子强度和样品体积转移膜：PVDF膜nitrocellulose膜抗体2021精选ppt15
免疫共沉淀免疫共沉淀：Ab－Pr1－Pr2非特异性结合：Pr1－Ab－Pr22021精选ppt16
免疫共沉淀12021精选ppt172354抗体很差，Western blot问题Loading比例不对样品太多正确
蛋白质-蛋白质直接相互作用2021精选ppt18Co-immunoprecipitationandantigen-antibodyinteraction（免疫共沉淀和抗原抗
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