DB41T 2655-2024 桃胚培养及移栽技术规程.docx

ICS65.020.20CCSB61

ICS

65.020.20

CCS

B61

河 南 省 地 方 标 准

DB41/T2655—2024

桃胚培养及移栽技术规程

2024-03-12发布 2024-06-11实施

河南省市场监督管理局 发布

DB41/T2655

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I

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II

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目 次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4胚培养 1

5炼苗 2

6大田移栽 3

附录A（资料性）胚培养所需WPM培养基的主要成分表 4

附录B（资料性）单位培养基加入母液量 5

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河南省林业局提出并归口。

本文件起草单位：河南农业大学。

本文件主要起草人：连晓东、冯建灿、张海朋、王小贝、谭彬、程钧、王伟、叶霞、张郎郎、李志谦、李继东。

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桃胚培养及移栽技术规程

范围

本文件规定了桃胚培养及移栽的术语和定义、桃胚培养、炼苗和大田移栽等技术。本文件适用于桃胚培养及移栽技术管理的全过程。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则DB41/T1815-2019桃简约栽培技术规程

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

胚培养

对由于营养或生理原因造成败育、发育不完善或需要后熟、从而导致播种后难以获得成苗或在发育

早期就败育或退化的种胚进行的早期离体培养。

3.2

胚培苗

通过胚培养技术获得的幼苗。

胚培养

培养容器与接种器械的灭菌

种胚接种容器推荐使用直径为3cm，高度为18cm的平底玻璃试管，接种器械为手术刀和长柄镊子。用洗洁精溶液洗刷试管和接种器械，再用清水冲洗3～5遍，放入烘箱烘干后，用纱布或纸等包好接种器械；将滤纸（11cm规格）放入合适培养皿中，然后用纸包裹；将所有用品用具在高压蒸汽灭菌锅中，121℃温度下灭菌20min。

培养基的配制与灭菌

培养基选择

以WPM培养基为桃种胚接种培养基，培养基成分表见附录A。

母液配制

所需化学试剂使用去离子水配制。根据附录A中培养基配方成分，配制大量元素母液A（20倍）、大量元素钙盐母液B（20倍）、微量元素母液C（100倍）、铁盐母液D（100倍）、有机成分母液E（100倍）。培养基母液试剂瓶分别贴上标签，标注母液名称、配制倍数和日期，置于冰箱冷藏保存。铁盐（母液D）保存在棕色试剂瓶中。

培养基配制

依据培养基配方和需要培养基体积，计算各种母液需用量和其它成分用量，见附录B。按照计算结果，称取琼脂和蔗糖用量，加入蒸馏水中，蒸馏水的量以培养基配制体积的1/3～1/2为宜，不断搅拌，熬至沸腾；然后加入相应母液，加蒸馏水定容，充分搅拌均匀；用1.0mol·L-1盐酸或1.0mol·L-1氢氧化钠，调节pH值至5.8；将培养基分装到平底试管中，深度占试管高度的1/3左右，用透气封口膜（过滤孔径0.3um）封口；将培养基放入高压灭菌锅中，121℃，灭菌20min。灭菌后培养基在干净、阴凉的室内常温存放，保存时间不宜超过2周。

种胚获取与消毒

从硬熟期的桃果实中取出桃核，将桃核上果肉去除干净，清水洗净备用。

将桃核放入有效氯浓度5%次氯酸钠溶液消毒20min；破核，用无菌镊子小心夹出种胚，放入灭菌的三角瓶中；在超净工作台上，用75%酒精浸泡种胚30s，无菌水冲洗2～3遍，然后用0.1%的升汞消毒5min或有效氯浓度为5%次氯酸钠溶液消毒10min，用无菌水冲洗3～5次。

种胚接种

将灭菌过的种胚放在无菌滤纸上，用手术刀和镊子将种皮去除，然后接种到WPM培养基上，约1/3～

1/4核仁长度（胚根朝下）深入培养基，每瓶接种1个。用封口膜封口。在培养瓶上标示代号和接种日期。

低温处理及培养

接种完毕，置于黑暗环境下，根据种子不同需冷量，4℃处理60d～90d，以完成种胚休眠。之后转移至培养室中，培养温度为23℃～