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一、目的要求;二、基本原理;菌落总数简介;菌落总数测定——卫生学意义;菌落总数测定流程(倾注平板法);菌落总数测定几点说明;大肠菌群;大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
1、普通乳糖蛋白胨培养液
菌落总数测定——卫生学意义
（每个稀释度做两个平行）
大肠菌群和大肠杆菌是评价卫生质量的重要指标，作为食品中的粪便污染指标。
近年来，有些国家在执行HACCP管理中，将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。
复发酵试验（可疑菌落是否产气菌？）
每皿内加入适量平板计数琼脂（PCA）
大肠菌群不是细菌学上的分类命名，而是根据卫生学方面的要求，提出的与粪便污染有关的细菌，即作为食品、水体等是否受过人畜粪便污染的指示菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
2、细菌菌落总数是指水中或食品检样经处理后，在一定条件培养后，所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数，其主要作为判定食品被污染程度的标志。
鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因而平板上所得菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位（colonyformingunits，CFU）报告。
食品中检出大肠菌群，表明该食品有粪便污染，既可能有肠道致病菌存在，因而也就有可能通过污染的食品引起肠道传染病的流行。
2、伊红美蓝培养基（EMB培养基）
用倾注平板法和涂布平板法计数，其平板上长出的菌落有何不同？为什么要培养较长时间（48小时）后观察结果？
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
（每个稀释度做两个平行）
菌落总数测定流程(倾注平板法)
水和食品中大肠菌群数是以每100mL（g）检样中大肠菌群最可能数（MPN）表示的。
检样1mL+9ml稀释液（磷酸盐缓冲液）
食品中检出大肠菌群，表明该食品有粪便污染，既可能有肠道致病菌存在，因而也就有可能通过污染的食品引起肠道传染病的流行。;??生学意义;初步发酵试验（产酸产气否？）
平板分离（伊红美蓝鉴别培养基）
革兰氏染色（是否G-无芽孢杆菌？）
复发酵试验（可疑菌落是否产气菌？）;大肠杆菌测定——EMB选择性分离鉴别;大肠杆菌测定——EMB选择性分离鉴别;大肠杆菌革兰氏染色照片;MPN检索表
本表采用3个稀释度：1mL(g)，0.1mL(g）和0.01mL(g)。每稀释度3管。;三、材料与器皿
一)实验材料
超市购买的盒装巴氏杀菌牛奶
二）培养基
1、普通乳糖蛋白胨培养液
2、伊红美蓝培养基（EMB培养基）;五、实验报告
1、简述实验过程。
2、计算实验结果。;二、基本原理;近年来，有些国家在执行HACCP管理中，将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。
大肠菌群和大肠杆菌是评价卫生质量的重要指标，作为食品中的粪便污染指标。
适当十倍稀释样品
2、细菌菌落总数是指水中或食品检样经处理后，在一定条件培养后，所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数，其主要作为判定食品被污染程度的标志。
判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。
适当十倍稀释样品
2、细菌菌落总数是指水中或食品检样经处理后，在一定条件培养后，所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数，其主要作为判定食品被污染程度的标志。
2、细菌菌落总数是指水中或食品检样经处理后，在一定条件培养后，所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数，其主要作为判定食品被污染程度的标志。
水和食品中大肠菌群数是以每100mL（g）检样中大肠菌群最可能数（MPN）表示的。
水和食品中大肠菌群数是以每100mL（g）检样中大肠菌群最可能数（MPN）表示的。
（每个稀释度做两个平行）
各取1mL分别加入灭菌平皿内
由于检样中采用30/35℃有氧条件下培养，一些特殊营养要求的细菌、厌氧菌、微需氧菌、以及非嗜中温细菌，均难以反映出来。
鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可以来源于单个细胞，因而平板上所得菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位（colonyformingunits，CFU）报告。
了解食品卫生微生物学的重要性及其原理
1、食品卫生微生物学指标包括细菌菌落总数、大肠菌群数和致病菌数量。
检样1mL+9ml稀释液（磷酸盐缓冲液）
水和食品中大肠菌群数是以每100mL（g）检样中大肠菌群最可能数（MPN）表示的。
大肠菌群不是细菌学上的分类命名，而是根据卫生学方面的要求，提出的与粪便污染有关
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