预处理提取之前用石油醚.docx

预处理提取之前用石油醚、乙醚等溶剂除去脂溶性杂质；用85％乙醇除去单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分。

提取多糖通常用水作溶剂来提取。还可利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离。根据多糖的溶解性可以用超滤离心分离法提取多糖。对于蛋白多糖，可利用加酶提取法提取多糖除蛋白传统上有Sevag法、三氟三氯乙烷法及三氯乙酸

－正丁醇法等。另外，也可以在多糖的水提液中加入中性蛋白酶和糜蛋白酶，与有机溶剂结合进行脱蛋白。除蛋白的效果可以用茚三酮反应检测，结果呈阴性；同时在200～280nm处测定除蛋白后样品的紫外吸收曲线来检测效果，除掉蛋白质的多糖溶液一般在260～280nm的紫外吸收峰会消失，说明多糖不含有蛋白

除色素可以用食品级粉末状活性炭吸附；也可以用双氧水对色素的有色基团产生破坏而除去色素；还可以用大孔吸附树脂柱层析脱去色素，这个方法还可以使多糖混合组分初步分离。

多糖含量测定测定还原性多糖的方法有3，5－二硝基水杨酸盐(DNS)比色法和Somogyi－Nelson法。另一类测定方法是利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其衍生物，然后再与酚类或胺类化合物缩合，生成有特殊颜色的物质这一性质进行测定，这类方法有地衣酚－硫酸法、苯酚－硫酸法和蒽酮－硫酸法。苯酚－硫酸法是用得较多的方法

多糖的纯化最常用的纯化多糖的方法是色谱法，包括离子交换色谱如DEAE－纤维素和凝胶色谱如葡聚糖凝胶（Sephadex）、琼脂糖凝胶（Sepharose）。实验中常将粗多糖经色谱柱洗脱，按洗脱曲线的不同峰收集不同的组分，从而分级得到各个均一多糖成分。

相对分子质量测定 常用的方法有凝胶色谱法、蒸汽压渗透计法、端基法、粘度法、光散射法、渗透压法和超滤法等。凝胶色谱法是比较常用的方法，用已知分子量样品作标准，建立标准曲线，求得待测多糖的相对分子质量。多糖相对分子质量只代表相似链长的平均而不是确切的分子大小。往往用不同的方法会得到不同的相对分子质量。

酸水解鉴定多糖的单糖组成常用的方法。

甲基化法阐明单糖的连接方式(键型)、重复结构中某种单糖的数目、末端糖的性质及分支点的位置等。

过碘酸氧化确定多糖中各种单糖的键型及其比例。

Smith降解阐明多糖中单糖的部分连接顺序和键型。

是多糖最主要和最重要的生物活性之一。目前己发现100多种中药多糖具有免疫促进作用。这些多糖通过对机体的细胞免疫、体液免疫和对补体系统、细胞因子的影响而产生免疫调节作用。香菇多糖体内给药能诱生IFN。柴胡多糖、刺五加多糖、羧甲基茯苓多糖、平盖灵芝多糖和银耳多糖等都能诱生干扰素。莪术多糖、三七多糖可诱导巨噬细胞分泌TNF-a。云芝多糖可提高小鼠腹腔巨噬细胞中TNF-a基因的表达。

抗肿瘤活性

大量的研究表明，中药多糖具有肯定的抗肿瘤作用，且几乎没有毒性。香菇多糖、裂褶菌多糖、猪苓多糖、云芝多糖等一批质量稳定、疗效确切、毒性和不良反应小

的多糖类药物已用于临床。香菇多糖除对移植癌的生长有抑制作用外，对原发性自身癌的生长有强抑制作用，对化学致癌及病毒致癌也有抑制效果。对于不能手术或再发性胃癌患者，与氟脲嘧啶并用，可延长生存期。目前临床上使用的均为从菌类等低等植物中提取的多糖。近年来，越来越多的具有抗肿瘤作用的高等植物多糖也血糖活性

研究表明，一些多糖能够促进胰岛分泌胰岛素，影响糖代谢酶的活性，抑制糖异生，而产生降血糖作用。薏苡仁多糖能显著降低正常小鼠及四氧嘧啶和肾上腺素所致的高血糖小鼠的血糖。人参多糖有降血糖作用。香菇胞外多糖可显著降低链脲菌素诱导的糖尿病大鼠血浆中的Glc、总胆固醇和二酰甘油水平。

被发现，如:苦楝多糖、桔梗多糖、库拉索芦荟多糖、黄皮树多糖，海枣多糖等。抗病毒活性

硫酸葡聚糖、角叉菜胶、肝素、硫酸软骨素等对艾滋病病毒(HIV)具有抑制作用，这些多糖大都含有硫酸基。1987年，德国Bayer公司研制的木聚糖硫酸酯对爱滋病有较好的疗效。科学家们还进一步发现硫酸化多糖能从多个环节和步骤干扰HIV对宿主细胞的侵袭，并对HIV有很高的选择性抑制作用。甘草多糖对牛艾滋病毒BIV、腺病毒、柯萨奇病毒均有较明显的抑制作用。中药夏枯草中分离出来的硫酸化多糖具有显著抗HIV的作用。

抗衰老活性

由于多糖类化合物可以增强机体的免疫功能，可作为自由基清除剂，在一定程度上延缓衰老，防治老年病。如刺五加多糖可延长果蝇平均寿命11.7-30%；枸杞多糖可延长家蚕五龄期寿命14%。此外，具有抗衰老作用的还有香菇、银耳、黑木耳、猴头菌、波叶大黄、黄芪、红芪、人参等生药中的多糖。