抗生素生产工艺.ppt

温度控制：红色链霉菌对温度敏感，全程31℃培养（若遇发酵剧烈有转稀趋势时适当降低发酵温度），48h粘度大高峰期，菌体衰老较慢，发酵液转稀时间推迟。pH控制：整个发酵过程维持pH6.6～7.2，菌丝生长良好，不自溶，发酵单位稳定。pH过低红霉素合成完全停止，过高（pH大于7.2）菌丝自溶，导致红霉素C的比例增加，红霉素A含量相应降低。第64页,共74页，2024年2月25日，星期天中间补料补糖：发酵过程，发酵液中还原糖控制在1.2%～1.5%范围内，每隔6h加入葡萄糖，直至放罐前12～18h停止加糖。补有机氮：每天补加3～4次，补加量由发酵液粘度决定，若粘度低，可增加补料量；若粘度高，可减少补料量，过高还可补加适量水，放罐24h前停止补料。补前提物：一般在发酵24～39h，当发酵液变浓，pH高于6.5时开始补入，每隔24h加一次，全程共加4～5次，总量为0.7%～0.8%，遇发酵单位增长趋势好时可适当多加。第65页,共74页，2024年2月25日，星期天三、红霉素的提炼工艺（一）提炼工艺流程1、溶媒法提炼红霉素工艺流程第66页,共74页，2024年2月25日，星期天2、溶媒法提炼红霉素工艺流程第67页,共74页，2024年2月25日，星期天3、薄膜浓缩法提炼红霉素工艺流程第68页,共74页，2024年2月25日，星期天红霉素是一种碱性抗生素，利用它在不同酸、碱度能溶解在不同溶剂中的特性，采用在醋酸丁酯及在水溶液中反复萃取而提纯和浓缩，最后在27～30万U/mL的丁酯溶液中冷冻结晶，即制成红霉素碱成品。1、发酵液的预处理和过滤发酵液中含有低浓度（0.8%）的红霉素，绝大部分是菌丝体和未发酵的培养基及代谢产物。蛋白质的存在在溶媒萃取时将产生严重的乳化现象，给提炼带来困难，需对发酵液进行预处理和过滤。用硫酸锌（氯化铝）沉淀蛋白质，使菌丝结团加快滤速。(二)提炼工艺要点第69页,共74页，2024年2月25日，星期天2、防止和去除乳化减少乳化，关键在于发酵液处理好，无混浊现象。同时选择合适乳化剂。早期去乳化剂：溴代十五烷吡啶（PPB），缺点：对成品色级有一定影响。改进去乳化剂：十二烷基磺酸钠（DS），色泽有所改进，但带来污染。酶制剂去乳化剂：蛋白酶和酯酶。第70页,共74页，2024年2月25日，星期天在萃取过程中，碱化和酸化的红霉素的收率和产品质量都有直接影响。碱化时：pH控制在10±0.5范围较适宜。过高，将引起红霉素的碱性破坏，使乳浊更严重；过低，对萃取不利，影响收率。酸化时：pH控制在4.9±0.3范围，过高，对红霉素稳定有利，但对萃取不利，影响收率；过低，对萃取有利，但红霉素发生酸性水解，影响质量。3、pH和温度第71页,共74页，2024年2月25日，星期天4、几条工艺路线比较溶媒反复萃取工艺路线：生产连续、周期短、收率高、产品质量好。但需要特殊设备，生物效价不高，需丙酮重结晶。薄膜浓缩法工艺路线：操作简单，易投产，但产品质量差，需丙酮重结晶。中间盐沉淀工艺：在萃取中加某些盐和酸使之生成红霉素碱或盐加以纯化。以红霉素乳酸盐沉淀法为国内许多生产厂家所采用。一次结晶成品可达930～960U/mg。不需用丙酮重结晶。第72页,共74页，2024年2月25日，星期天本节思考题1、抗生素的定义、命名基分类？2、抗生素剂量表示法？3、青霉素生产工艺？4、红霉素生产工艺？第73页,共74页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第74页,共74页，2024年2月25日，星期天**二、青霉素的发酵工艺(一)发酵工艺流程第32页,共74页，2024年2月25日，星期天第33页,共74页，2024年2月25日，星期天(一)发酵工艺操作要点1、种子丝状菌种子的制备生产孢子的制备：由沙土管内孢子在拉氏培养基的母颈斜面上，25℃，培养6～7d，制成绿色孢子悬浮液，再接入装有大米的茄子瓶培养6～7d，大米孢子干燥保存。每批孢子必需进行严格摇瓶试验，测定效价及杂菌情况。种子罐种子：种子培养要求产生大量健壮的菌丝体，因此，培养基应加入比较丰富的易利用的碳源和有机氮源。第34页,共74页，2024年2月25日，星期天青霉素采用三级发酵一级种子发酵：发芽罐.小罐，接入小米孢子后，孢子萌发，形成菌丝。培养基成分：葡萄糖，蔗糖，乳糖，玉米浆，碳酸钙，玉米油，消沫剂等。通无菌空气，空气流量1：3（体积比）；充分搅拌300－350r/min；40～50小时；pH自然，温度27