植物组织培养.ppt

（一）光照的影响培养中光照是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、以及光周期等方面：光周期：黑暗与光照交替的时间光强：光照强度光质：光的波长第95页,共107页，2024年2月25日，星期天例1：黑暗中培养的烟草花药，其胚状体的分化与幼植物的生长，同经光照培养一样的多

例2：短日照敏感的葡萄品种，它的茎切段，仅在短日照条件下才能分化成根

例3：对日照不敏感的葡萄品种，可在任何光周期下分化成根

结论：光周期的需要与否，应根据植物种类、培养的目的来决定

1、光周期对植物细胞脱分化和再分化的效应第96页,共107页，2024年2月25日，星期天?最常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。

愈伤组织诱导阶段：一般采用三种做法：全暗、周期性光照、散射性光照。依据植物种类不同做法不同，多数植物适合全暗或周期性光照。

器官发生阶段：一般给予周期性光照比较好。

离体培养中光周期的调节第97页,共107页，2024年2月25日，星期天光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响，从目前的研究情况看，光照强度对外植体、细胞的最初分裂有明显的影响。

一般来说，光照强度较强，幼苗生长的粗壮；而光照强度较弱，幼苗容易徒长。

离体培养条件下常用的光量，一般为1000-4000lx（勒克斯）。离体培养中通常难以达到4000lx，一般光量在2000-3000lx。光照强度的高低直接影响器官分化的频率高光量可以降低植物体内生长素水平，低光量使植物体内生长素水平较高，容易生根。2、光量的影响第98页,共107页，2024年2月25日，星期天光质对愈伤组织诱导，培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响。

如百合珠芽在红光下培养，2周后，分化出愈伤组织。但在蓝光下培养，几周后才出现愈伤组织。

离体培养条件下，一般用日光灯进行光照，光谱成分主要是蓝紫光，波长为419-467nm。

对芽分化有效光谱成分为蓝紫光，根分化则受600-680nm所刺激。3、光质的影响第99页,共107页，2024年2月25日，星期天（二）温度的影响培养都是在23～27℃之间进行，一般采用25±2℃。喜温性植物：茄科、禾本科、兰科等。培养温度一般控制在26-28℃。冷凉性植物：百合科、十字花科、菊科等。通常培养温度控制在18-22℃或25℃。第100页,共107页，2024年2月25日，星期天（三）湿度的影响组织培养中湿度的影响有两个方面：一是培养容器内的湿度条件。容器内主要受培养基水分含量和封口材料的影响。一是环境的湿度条件。环境的相对湿度一般要求70～80%。常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。第101页,共107页，2024年2月25日，星期天（四）pH值?不同的植物对培养基最适pH值的要求也是不同的（见表），大多在5.5-6.5左右，一般培养基皆要求5.8，这基本能适应大多数植物培养的需要。种类最适PH值种类最适PH值杜鹃4.0月季5.8越橘4.5胡萝卜、石刁柏6.0蚕豆5.5桃7.0番茄、葡萄5.7第102页,共107页，2024年2月25日，星期天一般来说pH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。因为高温灭菌会降低PH值（约0.2-0.3个PH值）因此在配制时常提高PH值0.2-0.3单位。第103页,共107页，2024年2月25日，星期天（五）渗透压培养基中由于有添加的盐类、蔗糖等化合物，因此而影响到渗透压的变化。通常1-2个大气压对植物生长有促进作用，2个大气压以上就对植物生长有阻碍作用，而5-6个大气压植物生长就会完全停止，6个大气压植物细胞就不能生存。第104页,共107页，2024年2月25日，星期天培养基各种物质中，糖对培养基渗透压起决定性作用。因此调节渗透压往往从调节糖浓度着手。糖除了作为渗透压调节物质外，还是培养基重要的碳源和能源。另外，甘露醇，山梨醇等也可以作为调节物质。渗透压调节物质第105页,共107页，2024年2月25日，星期天氧气是培养中必需的因素，瓶盖封闭时要考虑通气问题，可用附有滤气膜的封口材料。通气最好的是棉塞封闭瓶口，但棉塞易使培养基干燥，夏季易引起污染。固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。培养室要经常换气，改善室内的通气状况。液体振荡培养时，要考虑振荡的次数、振幅等，同时要考虑容器的类型、培养基等。

（六）气体第106页,共107页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第107页,共107页，2024年